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【摘 要】目的：观察糖尿性白内障晶状体上皮细胞凋亡基因Bcl-2和Bax的表达。方法：取晶状体前囊膜，采用免疫组化法检测凋亡相关基因Bcl-2和Bax的蛋白表达，与老年性白内障患者进行比较。结果：Bcl-2和Bax在两者晶状体上皮细胞中的均有表达，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：与老年性白内障患者相比，糖尿病性白内障LEC凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达更为明显
【关键词】LEC；凋亡；Bcl-2；Bax
【中图分类号】R776.1 【文献标识码】B 【文章编号】1003-5028（2015）6-0793-01
【Abstract】Objective:To investigate the expressions of apoptosis-related gens Bcl-2 and Bax in LEC of diabetic cataract. Methods:The anterior capsules were used in the following study.The expressions of apoptosis related genes Bcl-2 and Bax protein were studied by immunohistochemical techniques，compared with senile cataract.Results:Bcl-2 and Bax protein were expressed in both of groups,the difference was statistically significant(P<0.05).Conclusion:Compared with senile cataract,the expressions of apoptosis related genes Bcl-2 and Bax protein were more obvious in diabetic cataract
【Keywords】LEC; apoptosis; Bcl-2; Bax
白内障是当今世界主要致盲眼病之一，糖尿病性白内障作为白内障患者中一个重要组成部分，其发病率逐年增高，糖尿病性白内障(DC)是糖尿病重要的慢性眼部并发症，其致盲率仅次于糖尿病视网膜病变(DR)[1]。晶状体上皮细胞(lens epithelial cells，LEC)凋亡在白内障形成过程中有着重要的作用，可能是非先天性白内障形成的共同细胞学基础，本文从细胞凋亡角度出发，探讨糖尿病性白内障与老年性白内障的不同。
本试验选用Bcl-2(B-cell lymphoma/leukemia gene-2)、Bax (Bcl-associated X protein)作为凋亡检测基因，观察其在糖尿病性白内障患者LEC中的不同表达，与老年性白内障进行比较，进一步探讨其作用机制，为糖尿病性白内障的防治提供理论依据及新的思路。
1 资料与方法
1.1 试验方法
1.1.1 临床收集2012年5月至2013年5月于我院就诊的老年性白内障病例56例（对照组），糖尿病性白内障39例（试验组），双眼白内障患者仅收集一眼资料。完善相关检查后安排白内障超声乳化联合人工晶体植入术。3例因撕囊过小未采用，其中包括老年性白内障2例，糖尿病性白内障1例。
1.1.2 术中环形撕囊，直径约5mm-5.5mm，制备石蜡切片。
1.1.3 对石蜡切片进行免疫组织化学染色。
1.1.4 观测LEC凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达。
1.2 观测指标
LEC细胞核和核周出现棕黄色反应物即为阳性表达，在100倍光镜下全面观察切片后，寻找Bcl-2、Bax阳性物质最丰富区域（即“热点”区，染色颜色最深或染色面积最多的区域），然后选择5个400倍视野的阳性细胞热点区，采用IPP图像分析系统测量各个指标阳性物质积分光密度，表示含量。
积分光密度：表示被测个体截面或投影轮廓或体积内光密度的积分值，亦是吸光物质的总含量，采用Mias-2000计算机图象分析系统测量。
1.3 统计分析
所有统计用SPSS16.0统计分析系统进行，各项指标均以均数士标准差（）表示。
2 结果
注：▲ 与对照组比较P﹤0.05
由表2可见：试验组凋亡促进基因(Bax)积分光密度（IOD）值较对照组低高，差异具有统计学意义(P<0.05)
3 讨论
细胞凋亡又称细胞程序性死亡，是组织发育形成和功能维持的生理现象，表现为细胞皱缩，染色质沿核膜聚集，胞体形成联体碎片，细胞分裂形成具有完整胞膜的凋亡小体，最后被吞噬细胞吞噬。细胞凋亡的发生受到细胞内凋亡调节蛋白的调控，这些凋亡调节蛋白分为促凋亡蛋白和抗凋亡蛋白两大类。在目前已知的凋亡调节蛋白中，Bcl-2家族在各类刺激信号引起的凋亡中起到关键的作用。Bcl-2即B-cell lymphoma/leudemia2基因(B淋巴细胞瘤/白血病-2基因)的简称，是在滤泡上B细胞内分离出来的一个原癌基因，其表达产物为Bcl-2蛋白，为细胞内膜相关蛋白。Bcl-2的人B细胞系中鉴定分离出一种蛋白质，命名为Bax。蛋白质序列分析表明，它与Bcl-2具有高度同源性。Bax的过度表达可以诱发细胞凋亡，并可拮抗Bcl-2的抑制细胞凋亡作用。Bax作为细胞凋亡基因的代表，Bcl-2作为细胞生存基因的代表，Bcl-2和Bax蛋白水平高低与凋亡调控直接相关，Bax增高，促进细胞凋亡，Bcl-2增高，抑制细胞凋亡。
晶状体上皮细胞凋亡是除先天性白内障以外的所有类型白内障形成的细胞学基础，是防治除先天性白内障以外的其它类型白内障的关键。范伟等[2]为探讨相关基因如何调节细胞凋亡的问题，对晶状体上皮细胞凋亡基因Bax、Bcl-2表达进行了研究。结果显示，Bax基因蛋白在晶状体上皮细胞中的表达与晶状体上皮细胞凋亡百分率呈正相关，Bcl-2基因在晶状体上皮细胞中的表达与晶状体上皮细胞凋亡百分率呈负相关。但糖尿病性白内障作为白内障一种特殊类型，其LEC中凋亡基因的表达是否有别老年性白内障，本试验结果显示，Bcl-2和Bax在糖尿病性白内障及老年性白内障LEC中均有表达，糖尿病性白内障LEC中Bcl-2和Bax的表达较老年性白内障更为明显。提示我们，血糖干预对延缓糖尿病性白内障发展至关重要。
参考文献：
[1]管怀进.我国防盲与眼科流行病学研究的现状及发展[J].中华眼科杂志,2010,46(10):938-943.
[2]范伟，吉祥，喻长泰．晶状体上以细胞凋亡及bcL2、bax表达与年龄相关性白内障形成的关系[J]．眼视光学杂志，2003，2(5)：75～78．
论文作者:文晓霞1,陈亮2,郭红建3,张敏3
论文发表刊物:《河南中医》2015年6月供稿
论文发表时间:2015/10/21
标签：白内障论文; 凋亡论文; 晶状体论文; 基因论文; 细胞论文; 糖尿病论文; 蛋白论文; 《河南中医》2015年6月供稿论文;