张小红
辰溪县人民医院 湖南 419500
摘要：目的：分析结核杆菌五种实验室检测方法比较差异。方法：选择2016年1月-2017年12月作为研究时间段，选择某医院就诊结核患者335例作为研究对象，即观察组，选择同期接受体检者210作为对照组，收集其循环血液样本及痰液标本，分别全自动染色+人工镜检、荧光探针PCR检测等五种实验室检测方法，分析检测结果。结果：观察组经全自动染色+人工镜检、荧光探针PCR检测、SAT检测、罗氏培养、结核抗体检测结核杆菌检测阳性率分别为34.93%、90.15%、95.52%、31.34%、65.37%均显著高于对照组的1.43%、0.00%、0.00%、0.00%、12.86%（均P＜0.05）。结论：实验室检测结核杆菌方法诸多，均可获得一定的阳性检测结果，其中以荧光探针PCR检测、SAT检测单项检测阳性率最高。
关键词：结核杆菌；实验室检测；诊断方法
肺结核在临床上比较常见，可累及机体多个脏器及系统，还能够作为其他疾病的高危因素或被其他疾病所影响，导致病情进一步恶化，尤其是对于老年、幼儿等免疫系统抵抗力群体而言，影响更加严重，不仅病情发展速度快，病情复杂多变，而且其他并发症发生风险较高，治疗效果也有限，诱发多器官衰竭风险也显著高于其他普通患者[1-2]。我国目前已经成为肺结核发病的重灾区，而肺结核患者若未能及时得到有效治疗，则很有可能导致患者病情进一步恶化，最终发展至难治性肺结核，存在较高的治疗难度及耐药风险，因此需尽早明确诊断，临床上常用诊断方法主要包括实验室诊断、影像学诊断等。本文选择2016年1月-2017年12月作为研究时间段，选择某医院就诊结核患者335例作为观察组，同期体检者210例作为对照组，收集两组受检者痰液及血液样本，分析检测结果。
1.资料与方法
1.1一般资料
本文选择2016年1月-2017年12月作为研究时间段，选择某医院就诊结核患者335例作为观察组，同期体检者210例作为对照组。观察组335例，男186例，女149例，年龄22-70岁，年龄平均（49.15±10.80）岁，病程3个月-8年，病程平均（24.88±3.52）个月；肺结核274例，结核性胸膜炎42例、淋巴结结核10例、结核性脓胸4例，其他5例；主要临床表现包括低烧、食欲差、盗汗等。对照组210例，男109例，女101例，年龄23-73岁，年龄平均（48.85±10.11）岁。纳入标准如下：（1）临床资料完整；（2）入院后完善血尿常规、生化检验，CT等影像学检查，结合临床表现，明确相应诊断；（3）精神系统无异常，能够与人正常交流，人格行为正常，能够与阅读文字资料；（4）能够耐受本次研究，研究中途无脱出；（5）所有受检者均对研究内容知情，自愿参与，并同医院签订知情同意书。排除标准如下：（1）凝血障碍、白血病等血液系统疾病；（2）肿瘤，除结核以外传染性疾病；（3）依从性较差；（4）心肝肾等重要脏器严重疾病。
1.2方法
所有受检者均在清晨清水漱口后，提取痰液样本，空腹状态下抽取外周循环血液5ml；主要仪器及试剂包括：全自动染色机（华速ZEEDO LSS-800双排染色机），由金华市华速科技有限公司提供；结核杆菌核酸检测试剂盒（荧光探针PCR法），由上海都宜生物有限公司提供；TB-SAT检测试剂盒（RNA恒温扩增）、改良罗氏培养基，均由健康苑医药零售有限公司提供；结核抗体检测试剂盒（金标法），由上海信裕生物科技有限公司提供；检验人员均严格按照无菌操作规程，按照仪器及检测试剂盒使用说明书完成检测，判断检测结果；统计阳性检测结果。
1.3统计学分析
本次研究选择SPSS22.0软件进行分析，利用百分比（%）表示计数资料，并施行检验，当P＜0.05，提示数据差异显著，具有统计学意义。
2.结果
观察组经全自动染色+人工镜检、荧光探针PCR检测、SAT检测、罗氏培养、结核抗体检测结核杆菌检测阳性率分别为34.93%、90.15%、95.52%、31.34%、65.37%，均显著高于对照组的1.43%、0.00%、0.00%、0.00%、12.86%（均P＜0.05）；详见表1。
3.讨论
结核病是因结核杆菌感染后所引起的传染性疾病，在全世界均有所分布[3]，据权威机构统计，2012年全世界新增结核病患者860万人，其中超过100万人死亡。而随着艾滋病等传染性疾病的流行、结核杆菌耐药性的布不断增加，这使得结核病治疗难度不断提高。一直以来，痰液涂片及痰培养是应用率较高的结核病诊断方法，存在着耗时长、效率低、阳性率低等特点，因此丰富检测手段，缩短检测时间是相关领域研究的重点课题，目前，结核杆菌检测手段已经获得一定的发展[4-5]。
本研究中，通过全自动染色+人工镜检、荧光探针PCR检测、SAT检测、罗氏培养、结核抗体检测结核杆菌。全自动染色机+人工镜检法是指利用仪器进行抗酸染色后人工镜检的方法；荧光探针PCR检测是指通过特异性荧光信号获知PCR全过程，灵敏度较好，自动化程度较高；SAT检测是指利用RNA恒温扩增检测的方法，属于我国自主专利技术，将荧光探针技术与RNA拷贝结合后检测结核杆菌；罗氏培养是指利用改良罗氏培养基培养后分离后镜检，虽然耗时相对于传统培养方法大大缩短，但检测成本较高，故推广存在一定的难度。结核抗体检测是用过血液学检测的方法[6-8]；本次研究中，仅全自动染色+人工镜检、结核抗体检测方法在对照组中筛查出结核病阳性病例，疑似隐形结核患者，或因接种过卡介苗。本次研究中，5种实验室检测方法在筛查结核杆菌方面均可获得一定的阳性率；荧光探针PCR检测、SAT检测单项检测阳性率，分别达到了90.15%、95.52%；观察组5种实验室检测方法阳性率均显著高于对照组（P＜0.05）。本次研究存在一定的局限性，比如并未联合检测，并未就对照组筛查阳性者进一步研究。
总之，实验室检测结核杆菌方法诸多，均可获得一定的阳性检测结果，其中以荧光探针PCR检测、SAT检测单项检测阳性率最高；建议根据临床需求，选择合适的检测方法，或可联用，以期获得更高的检查准确性。
参考文献：
[1]段静，王艳，袁杭，等.结核杆菌五种实验室检测方法比较[J].现代检验医学杂志，2014，29（4）：79-82.
[2]朱杰.肺结核患者痰结核的实验室检查分析[J].世界最新医学信息文摘（连续型电子期刊），2016，16（23）：129，132.
[3]杨芝光，周丽.结核杆菌实验室检测技术与临床应用进展[J].临床检验杂志（电子版），2017，6（4）：826-828.
[4]蔡杏珊，马品云，张院良，等.实时荧光核酸恒温扩增检测技术在结核病诊断中的临床应用[J].中国防老痨杂志，2014，36（6）：458-461.
[5]杨顺利，范梦柏，商亚丽，等.BACTEC-MGIT 960快速分离培养结核杆菌实验室检测效果分析[J].中国药物与临床，2015（10）：1501-1503.
[6]牛群，刘志辉，孟繁荣，等.荧光定量PCR和抗酸染色检测结核杆菌的相关性[J].国际医药卫生导报，2017，23（15）：2375-2377
[7]路晓红，付玉荣，伊正君.基于核酸检测诊断结核分枝杆菌感染的研究进展[J].中国人兽共患病学报，2015（10）：967-971.
[8]戴芸，张珏，乔昀.手工法和全自动机器法查找结核杆菌效果比较[J].检验医学与临床，2015（23）：3558-3559.
论文作者:张小红
论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2018年6月18期
论文发表时间:2018/8/22
标签：结核杆菌论文; 结核论文; 荧光论文; 探针论文; 实验室论文; 方法论文; 肺结核论文; 《中国误诊学杂志》2018年6月18期论文;