时潘 刘家言
（南京医科大学康达学院 江苏 连云港 222000）
【摘要】 目的：研究人参皂苷对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的小鼠结肠炎的防治作用。方法：健康昆明种小鼠，随机分为正常组N、模型组M、人参皂苷组G，建立葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎模型。正常组、模型组用0.9％氯化钠溶液灌胃，人参皂苷组用人参皂苷溶液灌胃。结果：与模型组相比，人参皂苷组小鼠结肠炎疾病活动度指数DAI评分和结肠粘膜组织学损伤评分(CMDI)明显下降(P<0.05)。结论：人参皂苷可减轻由DSS诱导的小鼠结肠炎的炎症症状。
【关键词】 结肠炎；葡聚糖硫酸钠；人参皂苷
【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）27-0037-02
Studies on the improvement of Ginsenoside on the colitis induced by Dextran sulfate sodium(DSS) in mice
Pan Shi Jiayan Liu
(Kangda College of Nanjing Medical University Jiangsu Lianyungang 222000)
【Abstract】 Objective To study the preventive and therapeutic effect of Ginsenoside on the colitis induced by Dextran sulfate sodium(DSS) in mice. Methods Healthy Kunming mice were randomly divided into normal group N, model group M and ginsenoside group G. The colitis induced by Dextran sulfate sodium(DSS) was established in mice.The normal group and the model group were treated with 0.9% sodium chloride solution, and the ginsenoside group was irrigated with the ginsenoside solution.Results Compared with the model group, Disease Activity Index(DAI)and Colon Mucosal Damage Index(CMDI were significantly decreased (P<0.05). Conclusion Ginsenoside can reduce the inflammatory symptoms of the colitis induced by DSS in mice.
【Keywords】 Colitis; Dextran sulfate sodium; Ginsenoside
前言
结肠炎是一种常见的肠道疾病，其常见临床症状为腹泻、腹痛、黏液便、血便[1]。引起的结肠炎的原因主要为遗传、自身免疫反应和神经精神因素[2]。随着现代快节奏生活和压力增多，结肠炎患者增多。因而寻找能有效治疗结肠炎的药物成为现代药学的焦点。人参皂苷是从人参中提取的固醇类化合物，具有抗炎，抗肿瘤等生物活性。人参皂苷的抗炎作用提示我们其在肠膜炎中是否能发挥作用。由葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的肠膜炎可以模拟患者肠膜炎的疾病症状，本实验将建立DSS诱导的肠膜炎模型研究人参皂苷对肠膜炎的防治作用。
实验部分：
1.材料与方法
1.1材料
1.1.1实验动物
昆明小鼠，由南京医科大学实验动物中心提供，生产许可证：SCSK(苏）20020031。
1.1.2药品与试剂
0.9%氯化钠注射液，辰欣药业股份有限公司，产品批号：1404242143；葡聚糖硫酸钠（DSS），北京联立信生物技术有限公司，产品批号：0216011050；人参皂苷，南京森贝伽生物科技有限公司，产品批号：52286596。
1.2方法
1.2.1实验动物分组
利用统计学软件随机生成数字，将30只健康昆明种小鼠，以每组10只随机分为正常组N、模型组M，人参皂苷组G。
1.2.2 DSS诱导的结肠炎模型建立及给药
正常组小鼠自由饮用蒸馏水；模型组、人参皂苷组小鼠自由饮用5%（W/V)DSS溶液7d。于造模第一天开始，正常组、模型组小鼠灌胃给予0.4ml0.9%氯化钠注射液，人参皂苷组小鼠灌胃给予0.4ml人参皂苷溶液（5mg/ml)。
1.2.3结肠炎疾病活动度指数(Disease Activity Index，DAI)评分
造模开始每天记录小鼠体重变化，并使用大便隐血试纸测定小鼠大便隐血程度。DAI评分=体重减失率分数+大便隐血分数，分值在0～8之间。体重下降评分：0分，无减轻；1分，减轻5％～9％；2分减轻10％～14％；3分减轻15％～20％；4分减轻大于20％。大便隐血评分：0分，隐血阴性(一)；1分，隐血弱阳性(+)；2分，隐血阳性(++)；3分，隐血强阳性(+++)；4分，肉眼可见血便。造模结束，脱颈处死小鼠，取出小鼠结肠并记录小鼠结肠的长度(自盲肠至肛门)。
1.2.4小鼠远端结肠组织切片评分
造模结束，脱颈处死小鼠，取出各组小鼠远端结肠进行固定（4%多聚甲醛）、石蜡包埋、切片及HE染色。对小鼠远端结肠组织HE染色切片进行组织学损伤评分(Colon Mucosal Damage Index，CMDI）。评分标准：0分，结肠黏膜正常；1分，少量隐窝丢失；2分，大量隐窝丢失；3分，隐窝全部丢失，黏膜上皮完整，伴有少量炎细胞浸润；4分，隐窝全部丢失，黏膜上皮破坏、糜烂，伴有大量炎细胞浸润。
1.3统计学处理方法
所有实验数据均以mean±s表示，运用SPSS 11.5统计软件处理分析，采用方差分析和t检验进行组间差异分析，以P<0.05为有统计学意义。
2.实验结果
2.1结肠炎疾病活动度指数(Disease Activity Index，DAI)评分
模型组小鼠DAI评分明显高于正常组，并持续整个造模过程（P<0.05)，见图A；说明由DSS诱导的小鼠结肠炎模型建立成功。人参皂苷组小鼠在灌胃给予人参皂苷溶液4天后，小鼠DAI评分明显低于模型组，并持续至整个造模结束（P<0.05)，见图A；说明人参皂苷可以减轻由DSS诱导的小鼠结肠炎疾病症状。模型组与正常组比较小鼠结肠长度明显降低（P<0.05)，人参皂苷组与模型组比较小鼠结肠长度明显升高（P<0.05)，见图B。
2.2小鼠远端结肠组织切片评分
对比各组小鼠远端结肠组织切片，正常组远端结肠组织可见粘膜上皮完整，隐窝结构完整、排列整齐，未见炎症细胞浸润(图C1)。模型组远端结肠组织表现可见粘膜上皮结构完全破坏、糜烂，隐窝结构完全缺失，伴有大量炎症细胞浸润(图C2)。人参皂苷组远端结肠组织表现可见黏膜上皮相对完整，隐窝结构部分缺失，伴有少量炎症细胞浸润(图C3)。CMDI评分可见，模型组明显高于正常（P<0.05)；人参皂苷组明显低于模型组（P<0.05)，见图D。
3.讨论
本研究通过建立DSS诱导的小鼠结肠炎模型，以探究人参皂苷对小鼠结肠炎的保护作用。在造模过程中，模型组小鼠DAI评分随小鼠饮用DSS溶液时间增长而升高，同时，小鼠结肠的CMDI评分明显高于正常组小鼠，说明所建立的小鼠结肠炎模型是成功的。而灌胃给予人参皂苷溶液可以降低DAI和CMDI评分，减轻小鼠肠道的炎症，说明人参皂苷对DSS诱导的结肠炎小鼠的结肠具有一定的保护作用。综上所述，人参皂苷可为临床治疗结肠炎提供的新的研究方向。
【参考文献】
[1]邓长生，夏冰.炎症性肠病[M].北京：人民卫生出版社，1998，125．
[2]中华中医药学会脾胃分会．溃疡性结肠炎中医诊疗共识(2009)[J].中国中西医结合杂志，2010，30(5)：527-532．
论文作者:时潘,刘家言
论文发表刊物:《医药前沿》2015年第27期供稿
论文发表时间:2015/11/2
标签：小鼠论文; 人参论文; 结肠论文; 结肠炎论文; 皂苷论文; 模型论文; 隐血论文; 《医药前沿》2015年第27期供稿论文;