王超凡
（北京航天总医院北京100000）
【摘要】目的：探讨基质金属蛋白酶3(MMP-3)基因启动子区rs522616(-709A/G)多态性与老年动脉粥样硬化性缺血性卒中的相关性。方法：选择年龄≥65岁的动脉粥化性缺血性脑卒中患者252例和同期健康体检者214例，应用PCR-RFLP方法检测MMP-3rs522616基因型。结果：MMP-3基因rs522616多态性在老年动脉粥样硬化性缺血性脑卒中病例组和正常对照组人群中分布无统计学差异(P=0309)。结论：基质金属蛋白酶3(MMP-3)基因rs522616多态性与老年动脉粥样硬化性缺血性脑卒中无明显相关性。
【关键词】卒中；基质金属蛋白酶3；单核苷酸多态性；遗传；动脉粥样硬化性
【中图分类号】R3221+21 【文献标识码】B【文章编号】1003-5028(2013)05-0324-01
动脉粥样硬化是短暂性脑缺血发作及缺血性卒中最常见的病因，炎性机制参与了动脉粥样硬化的病理过程。近年研究表明，基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMPs）与脑卒中、动脉粥样硬化斑块的发生发展相关［1,2］。基质金属蛋白酶（MMPs）是锌和钙依赖的内肽酶家族，具有促进炎性细胞浸润，平滑肌细胞迁移、增生和新生血管形成的作用［3］1。其中，MMP-3是MMPs家族的重要成员，其功能主要是调节细胞外基质的重建，它不仅能降解胶原、蛋白聚糖、弹性蛋白、纤维连接蛋白等几乎全部的细胞外基质，而且可激活其他的MMPs，与冠心病和肺癌等多种疾病相关［4～6］。研究表明，MMP-3多态性rs522616可能与颈动脉狭窄及缺血性脑卒中相关［2,7］。
MMP-3基因定位在11号染色体长臂11q222-223区域。本研究采用候选基因病例对照的关联分析方法，探讨MMP-3基因单核苷酸多态(SNPs)与老年动脉粥样硬化性缺血性脑卒中的相关性。
1资料和方法
11研究对象：选择2009年3月～2012年12月在我院神经内科住院的年龄≥65岁的缺血性脑卒中患者252例病例组，男150例，女102例，年龄60～84岁，平均(6183±1135)岁，均为汉族。全部病例均按国际疾病分类第9版(ICD9)的标准诊断。所有患者均行头颅MRI及颅内外血管方面检查（包括以下一项或几项：MRA、TCD、颈动脉超声、头颈CTA），血管评估存在大动脉粥样硬化证据，并排除动脉炎、外伤、血液病、药物、肿瘤、脑血管畸形或动脉瘤、心源性栓塞、小动脉病变等引起的脑卒中患者。选择同期年龄和性别相匹配的健康体检者214例作为对照组，男126例，女88例，年龄60～82岁，平均(6067±1089)岁，无脑卒中、肝、肾、血液病、自身免疫性疾病、甲状腺疾病、妊娠和脑血管病史。所有受试者均签署知情同意书。
高血压定义为收缩压≥140mmHg和(或)舒张压≥90mmHg，或既往高血压病史当前应用降压药。吸烟定义为5年间至少吸烟5支/d。糖尿病定义为有胰岛素、降糖药使用史，或空腹血糖水平≥7．0mmol/L。高脂血症定义为血清TC水平>5．72mmol/L和(或)TG水平>170mmol/L，或既往升高目前正服用降脂药。
表1受试者一般临床资料比较
注：与对照组比较，aP<0．01
12PCR-RFLP方法检测：每个受试者采集2～3ml静脉血，应用Qiagen全基因组DNA提取试剂盒(德国，柏林)从全血中提取基因组DNA。应用PCR-RFLP的方法检测MMP-3基因s522616。采用Primer50软件设计引物，引物序列如下，上游引物：5’-GGAAAGGAAGAAAACAGAAGAGC-3’，下游引物：5’-CCTCATGCACAGAAT-AGAACA-3’。
13统计学方法：用SPSS 13．0统计软件进行数据处理。x2拟合优度检验计算Hardy-Weinberg平衡。计量资料的比较采用方差分析，基因型和等位基因频率比较采用x2检验，相对风险率用比值比(odds ratio，OR)和95％可信区间(confidence interval，CI)表示。P<0．05为差异有统计学意义。
2结果
本研究纳入老年动脉粥样硬化性缺血性脑卒中252例，正常对照214例。两组在年龄、性别方面差异无统计学意义，在高血压病史、糖尿病史、高脂血症史、吸烟史方面差异有统计学意义(表1)。病例组和对照组rs522616位点基因型分布都符合Hardy-Weinberg遗传平衡。如表2所示，病例组和对照组相比，rs522616基因型（P=0309）和位点（OR0828,95%CI0640–1072,P=0151）频率差异未见统计学意义。
表2两组人群基因型及等位基因的比较［n(%)］
每个单元格内容代表：人数（比例）,x2和p值
用卡方检验。
3讨论
本研究通过对252名老年动脉粥样硬化性缺血性脑卒中患者及214名正常对照进行MMP3 rs522616多态性检测，未发现两组存在统计学差异（P>005）。
先前有研究认为MMP3 rs522616多态性可能与大动脉粥样硬化性缺血性卒中相关［7］，但在本研究中未证实。考虑原因有以下几点：第一、选择人群的差异。不同患者动作粥样硬化的程度不同，颅内外动脉狭窄程度自10%～90%不等，不同程度狭窄可能与不同病因相关，从而对结果产生影响。第二、混杂因素的参与。脑卒中组患者多存在高血压、糖尿病、高脂血症等基础疾病，以上疾病患病比例明显高于正常对照组。这可能对结果造成一定影响，增加假阳性率的发生。
综上所述，本研究认为MMP-3 rs522616多态性与老年动脉粥样硬化性缺血性脑卒中无明确相关性。脑梗死发病机制复杂，是获得性危险因素如生活方式、高血脂、高血压、糖尿病等和种族、地域、环境、遗传性危险因素如基因多态性等共同相互作用所致．本研究样本含量较小，缺乏大规模、前瞻性特点，尚需扩大样本深入研究，为临床进行针对性防治提供了科学的实验依据。
参考文献
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［6］田建军，徐美兰，荆换敏.基质金属蛋白酶3及其抑制因子2在肺鳞癌中表达及临床意义［J］.华西医学,2013(03).
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论文作者:王超凡
论文发表刊物:《河南中医》2013年4月第1期供稿
论文发表时间:2014-3-18
标签：缺血性论文; 基质论文; 多态性论文; 动脉论文; 蛋白酶论文; 粥样论文; 基因论文; 《河南中医》2013年4月第1期供稿论文;