刘智成 易明忠
1.常宁市疾病预防控制中心检验科 421500；2.常宁市中医院检验科 421500
【摘 要】目的：分析ELISA，RPR、TRUST、TPPA四种方法检测梅毒螺旋体抗体的结果。方法：选择我中心性病艾滋病科2014年7月-2015年6月进行检查的157份梅毒患者血清标本，选择同期在我中心性病艾滋病科进行检查的非梅毒患者血清146份。所有血液样本均经ELISA，RPR、TRUST、TPPA四种方法检测，回顾性分析患者检查结果。结果：梅毒患者经四种检验方法检测为阳性率分别为96.82%、96.18%、80.25%、86.62%；而非梅毒患者检出阳性患者较少，两组比较差异有统计学意义（p＜0.05）。另外，经卡方检验，TPPA和ELISA在阳性及假阳性检出率上均显著优于Trust和RPR，差异有统计学意义（p＜0.05）。而RPR与Trust比较无明显差异（p＞0.05）。结论：TPPA和ELISA可以作为检验梅毒螺旋体抗体的指标，RPR与Trust则不适用于筛查梅毒螺旋体抗体，因此在实际的临床诊断中应合理使用。
【关键词】梅毒螺旋抗体；酶联免疫吸附；明胶凝集试验；阳性率
梅毒是临床上常见的一种经性途径传播的疾病，因苍白螺旋体引起的慢性、系统性疾病。梅毒螺旋体存在于患者的皮肤、黏膜中，当携带梅毒螺旋体的患者与正常人性接触后，皮肤或粘膜如果有细微的破损，可导致正常患者患病。梅毒的潜伏期较长，传染性较高，很多患者在患病后早期无明显症状，因此及早的诊断和治疗是控制传染率，提高患者生活质量的关键[1]。ELISA，RPR、Trust、TPPA四种方法是临床上针对该病的主要诊断方式，本次研究就我中心性病艾滋病科检查的157例梅毒患者作为研究对象，探讨四种检测方法检测梅毒螺旋体的效果。
1 资料与方法
1.1一般资料
选择我中心性病艾滋病科2014年7月-2015年6月进行检查的157份梅毒患者血清标本，选择同期在我中心性病艾滋病科进行检查的非梅毒患者血清146份。157例梅毒患者中，男66例，女91例，年龄最小的15岁，年龄最大的65岁，平均（41.4±6.5）岁。146例非梅毒患者中男75例，女71例，年龄最大的68岁，最小的17岁，平均（42.4±6.8）岁。排除意识障碍、严重肝肾功能疾病和不签署同意书的患者，两组患者在性别、年龄等资料上比较差异无统计学意义（p＞0.05）。
1.2试剂与仪器
ELISA检测试剂：上海科华生物工程股份有限公司生产
RPR检测试剂：上海荣盛生物药业有限公司生产
Trust检测试剂：上海荣盛生物药业有限公司生产
TPPA检测试剂：日本富士瑞必欧株式会社生产
试剂均在效期内使用
仪器：意大利亚特斯公司生产 NEXGEN four –ADALTIS全自动酶联免疫分析仪，离心机，水浴箱，OLYMPUS光学显微镜
1.3 方法和结果判定
1.3.1所有检测操作程序和结果均按照试剂及仪器说明书严格执行。
1.3.2抽取患者静脉血3ml，置于真空采血管中，加入3.2%柠檬酸钠抗凝剂（四川绵竹鸿基制药有限责任公司，国药准字H20073118），用羟乙基淀粉以离心机3000r/min离心两次，将部分红细胞和多余的血浆分离，并置于-20℃的冰箱内保存[3]。
1.3.3TPPA阳性：将血清和TPPA混合，将梅毒螺旋体致敏明胶颗粒与血清中梅毒螺旋抗体结合，产生玫瑰红色时判断为阳性。ELISA阳性：使用纯化的梅毒螺旋体重组蛋白抗原以包被固相板条，加梅毒血清和辣根过氧化物酶标记的人IgG抗体，利用仪器检测特异性梅毒抗体数量。RPR阳性：将RPR抗原悬浮液加入血清中，以旋转仪水平转动纸卡，在光线充足的情况下，形成黑色凝集块则判定为阳性。Trust阳性：使用卵磷脂、心磷脂和胆固醇作絮状凝集试验，Trust中加入甲苯胺红颗粒，出现红色絮状凝集则判断为阳性。
1.4统计学处理
将统计数据纳入统一表格，以SPSS20.0统计学软件，对其进行合理数据处理与分析，经卡方验证计数资料（n%），经t验证计量资料（?x±s），当P<0.05时，差异有统计学意义。
2 结果
梅毒患者经四种检验方法检测为阳性率分别为96.82%、96.18%、80.25%、86.62%；而非梅毒患者未检出阳性患者较少，两组比较差异有统计学意义（p＜0.05）。另外，经卡方检验，TPPA和ELISA在阳性及假阳性检出率上均显著优于Trust和RPR，差异有统计学意义（p＜0.05）。而RPR与Trust比较无明显差异（p＞0.05），详见表1。
3 讨论
梅毒螺旋体也就是梅毒的病原体，其不易着色、透明，只在人类中感染，分为获得性梅毒和胎传梅毒两种类型。获得性梅毒主要通过性接触传染，而胎传梅毒主要通过胎盘，从脐带血循环传给胎儿最终引起全身感染。梅毒的致死率较高，因此及早的诊断是缓解患者症状，降低死亡率的关键[4]。事实上，梅毒螺旋体含有表面抗原，能够刺激机体产生特异性凝集抗体和螺旋体制动抗体，当其进入人体后会破坏人体组织，当组织中的凝脂粘附在螺旋体表面形成复合抗原后，使得机体产生抗磷脂的自身抗体。
ELISA，RPR、Trust、TPPA四种方法是目前临床检诊的常用方法，ELISA检验法是通过将抑制抗原或抗体吸附在固定载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行，并用洗涤法将其游离成分洗净。最后通过分辨底物的颜色判断免疫反应。TPPA也是目前公认诊断梅毒较好的方法，因人体被梅毒螺旋体感染后，此抗体会在体内持续存在并且终身保留，其检测结构不随病情的变化发生改变，因此对个时期的疾病检测结果较为稳定[5]。RPR适用于梅毒诊断的初筛试验，通过检查患者血清中的非特异性反应素，但因该反应素在软性下疳出现4周后才会被检测到，因此只能作为初期的筛查。Trust是一种非特异性的梅毒筛选试验，其结果也会受到自身免疫性疾病的感染而发生变化[6]。
从表1可知：
1.梅毒患者经四种检验方法检测为阳性率分别为96.82%、96.18%、80.25%、86.62%；而非梅毒患者检出阳性患者较少，两组比较差异有统计学意义；
2.经卡方检验，TPPA和ELISA在阳性及假阳性检出率上均显著优于Trust和RPR，差异有统计学意义；而RPR与Trust比较无明显差异。TPPA和ELISA可以作为检验梅毒螺旋特异性抗体的指标；RPR与Trust在筛查梅毒方面须慎重使用，RPR与Trust检测非特异性梅毒螺抗体滴度变化在判定梅毒治疗效果应有一定意义；四种方法联合检测减少漏诊和误诊机会，对梅毒检诊价值更合理，更安全。
参考文献：
[1]李楚潮.ELISA，RPR、Trust、TPPA四种方法检测梅毒螺旋体抗体的结果分析[J].当代医学，2010，16（20）：9-10.
[2]余倩，何翠娥，胡志东等.1例梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验假阳性分析[J].国际检验医学杂志，2015，23（8）：1159-1160，1162.
[3]彭丽华.ELISA等四种方法检测梅毒螺旋体抗体的结果分析[J].现代养生B，2015，（8）：41-42.
[4]宋焕景，侯生根，陈建春等.梅毒特异性抗体试验生物学假阳性分析[J].国际检验医学杂志，2013，34（14）：1846-1847.
[5]金小花.不同血清学检测方法对梅毒螺旋抗体检测效果对比分析[J].健康研究，2014，34（2）：146-148.
[6]胥国强，康清秀，蒲泽宴等.4种方法检测梅毒螺旋体抗体结果的比较及应用评价[J].国际检验医学杂志，2011，32（16）：1869-1870.
论文作者:刘智成,易明忠
论文发表刊物:《航空军医》2016年第12期
论文发表时间:2016/7/20
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