王恩军 陈李莹 靳 祎 刘红霞 杨栋慧 孟 明（通讯作者）
河北大学 河北保定 071000
摘要：目的 确定中药复方蛭元方主要组分水蛭、红花、川芎采用不同方法处理后成分是否发生变化。方法 水蛭、红花、川穹经有机物提取、单煎、合煎、分煎处理后，采用薄层色谱法对所得样品中成分进行定性分析。结果 水蛭醇提物和单煎剂出现1条带，合煎剂出现3条带，分煎剂出现4条带；红花醇提、单煎、合煎、分煎供试品在同一位置出现相同颜色的一个条带；川芎石油醚提取物出现4条带，水煎剂、合煎剂、分煎剂各出现2条带。结论 水蛭醇提物和单煎剂中成分相同，分煎剂较合煎剂有新成分产生；红花醇提物和水煎剂中成分相同，分煎剂和合煎剂中所含成分相同；川芎水煎剂与有机物浸提物相比部分成分消失，分煎剂和合煎剂中所含成分相同。
关键词：蛭元方；薄层色谱法；分煎；合煎；单煎
类风湿关节炎（Rheumatoid arthritis，RA）是一种以慢性侵蚀性关节炎为特征的全身性自身免疫病，因其发病率高、病情迁延难愈越来越受到人们的关注[1，2]。本课题组研究表明中药复方蛭元方对类风湿关节炎有较好的临床治疗效果[3，4]，但蛭元方采用传统的混煎进行制备，服用较为不便。本试验旨在研究蛭元方主要成分水蛭、红花、川芎在不同方法处理后成分的变化情况，为开发蛭元方成为免煎中药颗粒饮片及临床用药提供理论依据。
1 材料和方法
1.1材料 水蛭、红花、川芎均为购自北京普生霖药业有限公司提供的优质地道药材。
1.2试剂与仪器 ①试剂：乙酸乙酯、苯、石油醚（天津市华东试剂厂）；95%乙醇（天津市源丰化工有限公司）；甲醇、甲酸、正己烷（天津市科密欧化学试剂有限公司）；硫酸（天津市大茂化学试剂厂）；冰醋酸（天津市兴复发展有限公司）；羧甲基纤维素钠、硅胶粉（青岛海洋化工有限公司）。②仪器：离心机（上海安亭科学仪器厂）；烘箱（上海福玛实验设备有限公司）；电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；电热恒温水浴锅（上海医疗器械五厂）。
1.3方法
1.3.1样品制备 水蛭、红花、川穹按质量比1：3：3比例，经两次加水、煎煮、滤过，分别制备单煎剂、合煎剂、分煎剂，分煎剂为单煎剂的合并液[3，5]。另取水蛭、红花、川穹分别加入乙醇、甲醇、石油醚进行浸渍，制备有机提取物。
1.3.2薄层色谱法定性分析 吸取上述样品分别点于薄层板上，展开、取出、晾干，观察斑点情况[6]。
2 结果
2.1水蛭薄层分析 水蛭的醇提、单煎、合煎、分煎供试品以正己烷—乙酸乙酯（4：1）为展开剂展开，紫外光灯（365nm）下观察荧光斑点情况。结果显示醇提物和单煎剂出现1条带，合煎剂出现3条带，分煎剂出现4条带，说明水蛭醇提物和单煎剂中成分相同，分煎剂较合煎剂有新成分产生（图1）。
2.2红花薄层分析 红花的醇提、单煎、合煎、分煎供试品以乙酸乙酯—甲酸—水—甲醇（7：10：3：10）为展开剂展开，晾干后观察条带情况。结果显示醇提、单煎、合煎、分煎剂在同一位置出现相同颜色的一个条带，说明红花醇提物、水煎剂、合煎剂、分煎剂中所含成分相同（图2）。
2.3川芎薄层分析 川芎的石油醚浸提、单煎、合煎、分煎供试品以正已烷—乙酸乙酯（9：1）为展开剂展开，紫外光灯（365nm）下观察荧光斑点情况。结果显示石油醚提取物出现4条带，水煎剂、合煎剂、分煎剂各出现2条带，说明川芎水煎后与有机物浸提物相比部分成分消失，分煎剂和合煎剂中所含成分相同（图3）。
3 讨论
抗类风湿性关节炎药物的研究具有广阔的临床需求，中药因其毒副作用小、不易造成有害残留而显出其较强的优势，但临床使用传统煎剂较为不便，如能将复方中药制剂制成中药饮片颗粒，将为患者提供更高效、安全、稳定、方便、快捷的临床治疗手段，也会极大的推动中医药在临床上的使用范围。本课题组研究表明蛭元方对类风湿关节炎有较好的临床治疗效果，本试验通过薄层色谱法比较蛭元方主要组分水蛭、红花、川芎在经有机物提取、单煎、合煎、分煎不同煎法处理后成分的变化情况。结果显示水蛭醇提物和单煎剂中成分相同，分煎剂较合煎剂有新成分产生；红花醇提物和水煎剂中成分相同，分煎剂和合煎剂中所含成分相同；川芎水煎后与醇提物相比部分成分消失，分煎剂和合煎剂中所含成分相同。故蛭元方临床用药时，所采用的制备方法值得进一步研究，蛭元方经不同加工方法处理后的功效需进行临床试验进一步明确，以期找到蛭元方的最佳加工方法，发挥其最好的治疗作用，为患者解决或减轻病痛。
参考文献：
[1]孟明，周蕾，高伟敏等．活化血小板对类风湿关节炎滑膜炎症和增生影响的实验研究[J]．细胞与分子免疫学杂志，2012，28（8）：828-829，833.
[2]孟明，梁红格，方皓等．PI3K/Akt/mTOR通路与自噬在类风湿关节炎滑膜细胞增生中的意义[J]．医学研究与教育，2013，30（5）：69-74.
[3]马玉琛，王玉乾，孟明等．蛭元方对血小板加剧的类风湿关节炎滑膜炎症和增生的影响[J]．中国实验方剂学，2012，18（18）：182-186.
[4]马玉琛，周蕾，陈冬志等．蛭元方对血小板促进大鼠类风湿关节炎滑膜炎症和增生的影响[J]．风湿病与关节炎，2012，1（4）：17-22.
[5]王新宏，李仪奎，范广平等．佛手散分煎与合煎的化学成分比较[J]．中成药，1996，18（12）：34-35.
[6]王文全，田吉，布日额．蒙药材火绒草的薄层色谱研究[J]．中国民族民间医药，2009，18（21）：29-30.
作者简介：王恩军，男，副教授。
通讯作者：孟明，教授，博士，研究生导师，从事中西医结合治疗自身免疫性疾病及免疫学研究与教学。
基金项目：河北省科学技术研究与发展计划项目（12277721）。
论文作者:王恩军,陈李莹,靳祎,刘红霞,杨栋慧,孟明（通讯作
论文发表刊物:《健康世界》2015年8期供稿
论文发表时间:2015/11/9
标签：条带论文; 水蛭论文; 成分论文; 川芎论文; 红花论文; 薄层论文; 关节炎论文; 《健康世界》2015年8期供稿论文;