徐太香[1]2002年在《果蝇钾通道附属亚基对成虫神经元钾电流的调节》文中研究表明目的：由于遗传学、分子生物学以及生物物理学技术的发展，果蝇成为研究离子通道的理想模型。随着众多细胞培养方法的建立，人们从果蝇神经元上得到了越来越多的电生理记录结果，已成功地将果蝇的胚胎、幼虫和蛹的神经元进行分离培养，并用于膜片钳研究。人们曾经尝试培养果蝇成虫神经元，但没有获得成功。本文旨在探索果蝇成虫神经元全细胞钾电流特性以及钾通道附属β亚基突变对成虫钾电流的影响。方法：运用机械振荡方法成功地获得活性好的野生型和β亚基突变果蝇成虫神经元，并用膜片钳记录了果蝇神经元全细胞电流特性。结果：在野生型果蝇以及β亚基突变成虫神经元上记录到两种A型钾电流(主要为失活快成分)和两种主要含几乎不失活成分的K型钾电流，其中小部分成虫神经元记录到类似于Shaw型钾电流，其特点为低电压激活、大电导、不同电压下充分激活时间不同。A型钾电流包括失活很快和稍慢两种，符合双指数拟合，果蝇β亚基突变改变了两种A型钾电流的数量，另外Hk~1调节了A型钾电流的稳态失活和恢复特性，但与表达系统、培养的巨大神经元以及在体的幼虫肌细胞不同，β亚基突变Hk~1成虫加速了A型钾电流的失活。进一步对Hk~1的等位基因突变Hk~4的研究发现了相同的趋向，只是改变不那么明显。β亚基突变主要影响一部分神经元。对突变体的药理学分析发现其钾电 摘要 流对钾通道阻断剂的敏感性降低，表明p亚基突变可能通过与a亚基的 相互作用改变了。亚基穿孔区周围的细胞内外结构。结论：试验结果表 明p亚基对果蝇成虫钾通道a亚基的结构起稳定作用，神经元的形态从 幼虫到成虫发生了很大变化，钾通道在果蝇发育过程中受到调控，p 亚基突变对A型钾电流的动力学和药理学的改变可能是其兴奋性增 高、出现肢体震颤表型的基础。机械分离方法方便、经济，不需使用 价格昂贵的蛋白酶以及酶解和细胞培养实验所需的复杂设备，同时更 好地保存了在位时膜的生理特性，避兔了酶解对细胞膜表面蛋白包括 受体和离于通道的损伤。
参考文献：
[1]. 果蝇钾通道附属亚基对成虫神经元钾电流的调节[D]. 徐太香. 青岛大学. 2002
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