张景华[1]2001年在《动脉粥样硬化与海马内老年痴呆样病理改变的关系》文中进行了进一步梳理目的：观察非痴呆中老年人海马区老年痴呆样病理改变的基本 情况，探讨老年痴呆样病理改变与年龄、性别和动脉粥样硬化的关 系，以及冠心病和高血压病史对老年痴呆样病理改变的影响。 方法：以我院1986年至2000年间含神经系统解剖的全身尸检 病例为基础，选择病史中无痴呆及精神异常记录的病例共138例为 研究对象，在外侧膝状体平面取双侧海马，经固定、切片后，分别 进行HE、硝酸银、刚果红染色。记录主动脉、冠状动脉、脑底动脉 和大脑后动脉的硬化程度，应用图象分析仪，分别记录老年斑、神 经原纤维缠结、平野小体、颗粒空泡变性、淀粉样血管病变在海马 区的分布情况，主要统计分析CAI区老年斑、神经原纤维缠结、平 野小体、颗粒空泡变性的密度（个／mm~2）、出现率与年龄、性别和动 脉粥样硬化的关系。按病史中出现冠心病、高血压病史进行分组， 选取年龄在65岁以上者共分为四组，对照组、冠心病组、高血压 组和同时合并两种病史组，统计分析不同疾病组间CAI 区老年斑、 神经原纤维缠结、平野小体、颗粒空泡变性的密度（个/mm~2）、出现 率的差别。 结果：1．老年斑、神经原纤维缠结、平野小体、颗粒空泡变性 主要分布在海马 CAI区，CA2只见到神经原纤维缠结，CA3可出现 老年斑、神经原纤维缠结。2．海马以CAI 区老年斑、神经原纤维缠结、 2 平野小体、颗粒空泡变性的密度（个／M）、出现率与年龄密切相关， 与性别和各动脉粥样硬化的的程度无关，各种AD样病理改变间的 出现率和数量互相关联。3．具有冠心病和高血压病史者神经原纤维 缠结的的出现率较对照组多，平野小体在冠心病组的出现率高。 结论：1．老年斑、神经原纤维缠结、平野小体、颗粒空泡变性 主要分布在海马CAI 区，CAZ－CA3区少见，CAA在海马区少见。2． 海马以 区 AD样病理改变与年龄密切相关，与性别、动脉粥样硬 化的程度无关，3．海马CAI区各种皿样病理改变间互相关联。4． 冠。G病、高血压病史与M样病理改变有一定关系。
刘斌[2]2017年在《补阳还五汤对APP/PS1双转基因小鼠神经血管单元RAGE/LRP1受体系统的调节机制》文中研究说明背景:阿尔茨海默病(AD)是老年痴呆的一种常见类型,其发病率逐年升高,造成较重的社会负担。AD主要病理特征包括由淀粉样蛋白(Aβ)在细胞外大量沉积形成的老年斑(SP)和神经元丢失。补阳还五汤(BYHWT)是中医补血祛瘀的经典名方,临床用于脑血管意外的治疗有确凿的疗效。本文在前期研究中发现BYHWT对AD小鼠学习记忆能力有明显改善作用,与晚期糖基化终产物受体(RAGE)/低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)信号通路有关。本研究继续对BYHWT作用的机制进行深入研究,以确定BYHWT是否作用于脑微血管内皮细胞(BMEC),影响BMEC外排转运体LRP1内向转运体RAGE调整Aβ中枢代谢而起到防治AD的作用。目的:研究BYHWT对AD小鼠学习记能力、海马形态、内皮细胞和血管形态、细胞凋亡和转运子RAGE/LRP1影响,研究BYHWT对采用Aβ25-35造模的微血管内皮细胞损伤的影响,通过观察AD细胞模型形态学变化、炎症介质分泌、细胞凋亡率和RAGE/LRP1转运体表达,探究药物是否通过影响BMEC功能从而对血脑屏障及神经血管单元产生影响,寻找药物的治疗靶点。方法:BYHWT提取物依据临床给药煎煮法制备。体内实验:选择7月龄APP/早老素(PS1)双转基因小鼠作为AD模型进行实验,采用聚合酶链式反应(PCR)验证APP和PS1基因表达。APP/PS1小鼠随机分为5组(n=20),Model组,多奈哌齐组,BYHWT高、中、低剂量组,另选择C57BL/6小鼠20只作为Control组。Control组和Model组给等体积的生理盐水,阳性药组给多奈哌齐0.001g·kg-1,高、中、低剂量组分别给37.06、18.53、9.26g·kg-1BYHWT(生药量),连续灌胃35日后行Morris水迷宫实验,测定小鼠学习记忆能力,采用苏木精-伊红(HE)染色、透射电子显微镜和Tunel染色观察各组小鼠海马形态结构和细胞凋亡。采用透射电镜(TEM)观察小鼠海马微血管形态改变,采用免疫组织化学(IHC)方法检测海马LRP1、载脂蛋白(Apo J)、RAGE 和 VCAM-1 表达。体外实验:体外培养脑微血管内皮细胞(BMEC),用含有24μmol/L的Aβ25～35细胞培养液培养24h,模拟AD细胞模型,用150μmol/L的BYHWT进行干预。采用光学显微镜观察细胞的一般形态,采用TEM观察细胞的超微结构,ELISA法检测炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α和Aβ25-35分泌,FCM检测细胞凋亡率,WB法检测细胞RAGE、LRP1、ICAM-1、VCAM-1、ApoJ、ApoE、NF-κBp65 蛋白表达。结果:体内实验Morris水迷宫实验显示,在空间探索实验中,与Model组相比,BYHWT高、中剂量组和Donepezil组小鼠穿越平台次数明显较低,目标象限停留时间明显延长。在定位航行实验中,BYHWT高、中剂量组和Donepezil组小鼠的逃避潜伏期明显缩短。HE染色显示Control组小鼠海马CA1区细胞排列规则,模型鼠细胞排列紊乱、细胞层数较少、核仁不清晰,BYHWT组海马CA1区细胞排列比较规则、核仁圆形或椭圆形、细胞层数较多。TEM观察到,ADModel组海马毛细血管变形且窄,内皮细胞不完整,腔外有大空泡,突触融合。经过BYHWT治疗,海马神经元形态逐渐恢复,毛细血管结构清晰,突触形态较好。Tunel法测细胞凋亡显示,与Model组相比,高、中剂量组海马Bcl-2/Bax比值明显增加。IHC显示,与Model组相比,高、中剂量组海马LRP1和ApoJ表达明显升高,且RAGE和NF-κBP65表达明显降低。体外实验通过透射电镜(TEM)观察血管内皮细胞形态,Model组细胞形态学与Control组细胞相比,发生异常改变,如细胞变圆、增殖减慢、细胞核固缩、核周隙增宽、核质比异常、粗面内质网扩张、线粒体空泡变性、微绒毛减少、脱落等。BYHWT低、中、高剂量组及Donepezil组与Model组相比细胞具一定程度的形态学恢复,其中BYHWT以中、高剂量组恢复较明显,且高剂量组及Donepezil组与Control组细胞形态最为接近。ELISA法显示,BYHWT高、中剂量可以下调Aβ诱导的BMEC细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α和Aβ25-35的含量,从而减轻Aβ诱导的BMEC细胞产生的炎症反应。同时流式细胞术显示BYHWT高、中剂量可以降低由Aβ诱导的BMEC细胞凋亡。Western Blot法显示BYHWT叁个浓度组与Model组相比对RAGE蛋白表达有明显下调作用,呈剂量依赖关系,高浓度组作用最明显(P<0.01);BYHWT叁个浓度组对LRP1蛋白表达有明显促进作用,呈剂量依赖关系,低浓度组即有明显作用(P<0.01);BYHWT叁个浓度组对NF-κBP65蛋白表达有明显下调作用(P<0.05);BYHWT叁个浓度组中仅高浓度组对ApoE蛋白表达有上调(P<0.05),低浓度和中浓度组没有作用。与Model组相比,BYHWT叁个浓度组对ICAM-1、VCAM-1蛋白表达有明显下调作用,呈剂量依赖关系,中浓度组(P<0.05)、高浓度组(P<0.01)作用最明显,差异有统计学意义;BYHWT叁个浓度组对NF-κBp65蛋白表达有明显下调作用,呈剂量依赖关系,中、高浓度组作用最明显(P<0.01)。结论:体内实验表明BYHWT高、中剂量可改善AD小鼠学习记忆能力,恢复AD小鼠海马CA1区形态,改善海马血管内皮细胞形态,其机制与BYHWT增强AD小鼠海马RAGE蛋白表达,减弱AD小鼠海马LRP蛋白表达密切相关。体外实验进一步得出BYHWT通过调节RAGE/LRP1转运体调节Aβ代谢,通过抑制NF-KBP65信号通路影响ICAM-1、VCAM-1蛋白介导的血管内皮炎症,改善Aβ诱导的脑微血管内皮细胞损伤引起的形态学改变,对脑微血管内皮细胞损伤产生保护作用。
黄畅[3]2017年在《基于mTOR信号通路探讨艾灸及艾烟对APP/PS1双转基因小鼠认知障碍的影响及机制研究》文中研究表明目的:观察艾灸及艾烟对AD小鼠学习记忆能力、特征性病理产物及氧化应激的影响,并基于mTOR信号通路探讨艾灸及艾烟抗AD的作用机制。方法:36只APP/PS1双转基因小鼠随机分为3组:常规艾灸组,艾烟组,模型组。将12只C57BL/6小鼠作为空白组。空白组及模型组小鼠每日放入固定器中,于室内空气中暴露;艾灸组小鼠每日放入固定器后,在关元穴处施灸;艾烟组小鼠每日放入固定器后,暴露于10-15mg/m3的艾烟环境,所有干预均为15min/天,6天/周,连续干预8周。于实验第9周开始进行开场实验、新物体识别实验、避暗实验及Morris水迷宫实验;行为学实验结束后,牺牲小鼠取材,采用免疫组化法测Aβ 1-42的表达;硫磺素S法测老年斑的总面积及斑块负荷;酶标法测定GSH含量,羟胺法测定SOD活力,硫代巴比妥酸法测 MDA 含量;Western blot 法测 p-tau(Ser202/Thr231)/tau、p-mTOR/mTOR、PI3K、p-AMPKα/AMPKα、PGC1α、p-4E-BP1/4E-BP1、p-p70S6K/p70S6 K、p-ULK、LC3-Ⅱ的蛋白表达水平;RT-PCR法检测mTOR、Akt、AMPKα1的mRNA表达。结果:1.行为学结果开场实验中,与模型组相比,艾灸组小鼠直立次数增加(p=0.048),艾烟组小鼠水平活动的距离(p=0.047)、穿越中央区的次数(p=0.014)均增加;新物体探索实验中,与模型组相比,艾灸组小鼠对新物体探索时间显着加长(p=0.012),艾烟组小鼠对新物体探索次数显着增多(p=0.019);在避暗实验中,与模型组相比,艾灸组小鼠(p=0.039)及艾烟组(p=0.000)小鼠的训练期犯错次数均显着降低;水迷宫定向航行实验中,随着训练天数的增多,各组小鼠潜伏期逐渐缩短。与模型组相比,测试第4d,艾灸组潜伏期明显低于模型组(p=0.006)。2.Aβ沉淀及tau蛋白磷酸化通过免疫组化检测发现,模型组Aβ 1-42的表达明显增多,海马CA1区及CA3区可见较多棕色沉淀斑块,艾灸组及艾烟组海马CA1区及CA3区偶见斑块且斑块面积较小;硫磺素S染色法测老年斑,与模型组相比,艾灸组斑块计数显着减少(p=0.025),艾灸组(p=0.008)及艾烟组(p=0.039)斑块负荷显着减少;Western blot法测tau蛋白磷酸化,与模型组相比,艾灸组海马p-tau(Thr231)显着降低(p=0.04)。3.脑组织氧化应激状态模型组小鼠脑组织SOD活力较空白组显着降低(p=0.000),MDA含量较空白组显着升高(p=0.000);与模型组相比,艾灸组小鼠脑组织GSH含量显着增高(p=0.002),SOD活力显着提高(p=0.02),MDA含量显着降低(p=0.009);艾烟组MDA含量显着降低(p=0.037)。4.mTOR上游信号通路模型组小鼠海马mTOR、p-mTOR、p-Akt/Akt较空白组显着升高(p<0.05),p-AMPKα、p-AMPKα/AMPKα较空白组显著降低(p<0.05);与模型组相比,艾灸组mTOR(p=0.029)、p-mTOR(p=0.005)、p-mTOR/mTOR(p=0.015)、p-Akt/Akt(p=0.002)均显着降低,p-AMPKα(p=0.049)、p-AMPKα/AMPKα(p=0.034)均显着升高;与模型组相比,艾烟组 mTOR(p=0.018)、p-mTOR(p=0.002)、p-Akt/Akt(p=0.029)均显着升高;mTOR的mRNA表达量模型组显着低于空白组(p=0.000),AMPKα1的mRNA表达量模型组显着高于空白组(p=0.014)。艾灸组AMPKα1的mRNA表达量较模型组显着降低(p=0.001)。5.mTOR下游信号分子各组小鼠海马4E-BP1、p-4E-BP1的表达均无明显差别;模型组小鼠海马p-p70S6K /p70S6K(p=0.001)、p-ULK(p=0.028)表达较空白组显着升高;与模型组相比,艾灸组p-p70S6K/p70S6K的比值显着降低(p=0.003),LC3-Ⅱ的表达量显着增高(p=0.034);艾烟组p-p70S6K/p70S6K的比值较模型组显着降低(p=0.006)。结论:1.艾灸与艾烟抗AD的效应有所不同,艾灸可有效改善AD模型小鼠学习记忆障碍,减少Aβ沉积及tau蛋白磷酸化;艾烟干预对模型小鼠学习记忆的改善作用不及艾灸干预,但艾烟干预可有效改善AD模型小鼠情绪相关的行为学异常,减少老年斑沉积。2.艾灸可能是通过抑制Akt活化,激活AMPKα,进而抑制mTOR,调节蛋白质翻译,增强自噬,减少Aβ及tau蛋白的生成,增强Aβ及磷酸化tau蛋白的清除,以延缓AD的发生发展。3.艾烟可能是通过抑制Akt活化,降低mTOR磷酸化水平,抑制p70S6K信号分子活化,抑制Aβ的积聚,减少老年斑的生成,来延缓AD的发生发展。
郭素[4]2012年在《中药复方海康灵抗老年性痴呆作用机制研究》文中研究说明目的优化中药复方海康灵的组方,探讨中药复方海康灵对Aβ致神经细胞损伤保护的作用及作用机制；证明海康灵对Aβ脑内注射致痴呆动物学习记忆功能障碍的改善作用；为海康灵抗老性年痴呆的临床应用,为中药多靶点的作用机制提供有效的实验数据及理论依据。方法第1部分中药复方海康灵组方的优化：采用体外细胞培养的方法,建立SH-SY5Y神经细胞H2O2损伤模型。通过测定细胞存活率(MTT法),检测海康灵复方中单味药与复方对SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用。第2部分中药复方海康灵对A β致神经细胞损伤保护的作用及机制：采用体外细胞培养的方法,建立SH-SY5Y神经细胞Aβ损伤模型。通过测定细胞存活率(MTT法),检测优化后的海康灵对SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用；倒置显微镜下观察细胞形态,通过Hoechst染色检测细胞凋亡。第3部分优化后的海康灵对Aβ脑内注射致痴呆动物的影响；通过对大鼠脑内注射Aβ1-40造成痴呆模型,采用Morris水迷宫观察海康灵对脑内注射Aβ1-40所致障碍大鼠学习记忆功能的影响。检测优化后的海康灵对Aβ脑内注射致痴呆动物的神经保护作用。结果第1部分：根据最佳有效剂量组建的海康灵新复方(浓度为0.159g·ml-1)同单味药和原复方比较,能减轻H202引起的SH-SY5Y神经细胞的损伤,明显提高细胞的存活率(P<0.01)。第2部分：根据最佳有效剂量组建的海康灵新复方(浓度为0.159g·ml-1)同单味药和原复方比较,能减轻Aβ引起的SH-SY5Y神经细胞的损伤,提高细胞的存活率(P<0.01),能有效抑制Aβ致神经细胞的凋亡。第3部分：Morris水迷宫行为测试结果显示,服用海康灵新复方的大鼠90s内在定位航行实验中大鼠的逃避潜伏期和游泳距离缩短。空间探索实验中大鼠原平台所在象限的游泳时间延长、第一次到达原平台时间缩短、穿越原平台的次数增加。脑组织生化指标结果显示,大鼠预先给予海康灵30d降低了Aβ1-40导致的MDA生成的增多,升高SOD和GSH-Px的活性,提高AchE活性。血液生化指标结果显示,预先给予大鼠海康灵后可使血中TG、T-CHO的含量下降,HDL-C升高,提示海康灵具有一定的降血脂、防止动脉粥样硬化的作用。结论海康灵新复方对H202和A β诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤具有明显保护作用。海康灵新复方能改善脑内注射Aβ1-40所致障碍大鼠学习记忆功能,其作用机制与抗氧化损伤有关。
佚名[5]2003年在《神经病学与精神病学》文中进行了进一步梳理双犯川沙M老年人脑白质疏松的影像学表现/韩向君…//中国老年学杂志一2(X犯,22(6)一463一4麟对oo一90岁老人324例行Cr与MRI检查,并作对比分析。结果:cr表现为双侧脑室旁脑白质呈对称性低密度灶,MRI表现为双侧脑室旁脑白质呈长Tlwi、
参考文献：
[1]. 动脉粥样硬化与海马内老年痴呆样病理改变的关系[D]. 张景华. 军医进修学院. 2001
[2]. 补阳还五汤对APP/PS1双转基因小鼠神经血管单元RAGE/LRP1受体系统的调节机制[D]. 刘斌. 黑龙江中医药大学. 2017
[3]. 基于mTOR信号通路探讨艾灸及艾烟对APP/PS1双转基因小鼠认知障碍的影响及机制研究[D]. 黄畅. 北京中医药大学. 2017
[4]. 中药复方海康灵抗老年性痴呆作用机制研究[D]. 郭素. 青岛大学. 2012
[5]. 神经病学与精神病学[J]. 佚名. 中国医学文摘(老年医学). 2003