马秀新
山东省庆云县疾病预防控制中心
【摘要】目的 确定一起食物中毒事件感染来源，明确病原体。方法 参照GB/T4789-2003《食品卫生微生物检验》方法采集剩余食物，病人的呕吐物、粪便等标本进行病原学检测，并对检出的沙门氏菌进行血清分型。结果 55份标本中有41份检出了沙门氏菌，未检出沙门氏菌、志贺菌、致病性大肠埃希菌和变形杆菌等。结论 此次食物中毒是由于食用了感染沙门氏菌的猪肉、羊肉所致。
【关键词】沙门氏菌；食物中毒；流行病学
中图分类号：R155.3文献标识码：A
[Abstract] Objective To determine food poisoning sources of infection, pathogens. Methods according to the GB/T4789-2003 "test" method of food microbiology gather surplus food, patients vomit and stool samples of pathogen detection, and the detection of Salmonella serotype. Results of 55 samples in 41 samples of the Salmonella were detected, Salmonella, Shigella, pathogenic Escherichia coli and Proteus. Conclusion the food poisoning is caused by eating Salmonella infection caused by pork and mutton.
[keyword] Salmonella; food poisoning; Epidemiology
2014年7月16日-17日，本县人民医院急诊科接收了数十例腹痛、腹泻病人就诊，且人数逐渐增多。病人先后出现以恶心、呕吐、腹痛、腹泻、发热等症状，并且都在某小区门口烧烤摊位食用烧烤猪、羊肉，水煮花生、毛豆等食品。经流行病学调查，综合临床症状，本实验室从烧烤摊位的食品和病人标本中分离出肠炎沙门菌证实，确定这是一起由肠炎沙门菌引起的食物中毒事件。现将调查情况报告如下：
1 流行病学调查
1.1基本情况 此次食物中毒共计35人，均在2014年7月16日晚在同一家烧烤摊就餐。3小时左右陆续出现呕吐、腹泻，患病率100％。年龄最小的9岁，年龄最大的52岁。潜伏期最短为3h， 最长为7 h，食用烤肉较少者症状较轻。
1.2临床症状 患者出现不同程度的发热，腹痛，恶心呕吐，排黄色稀水样便。其中腹泻35例(100％)、发热35例(100％)、腹痛30例(85.7％)、恶心28例(80.0％)、头痛22例(62.9％)、呕吐23例(65.7％)，无重症和危重病例。病人通过抗菌素治疗2 h后好转。
2 材料与方法
2.1标本采集
采集食物中毒患者的粪便标本30份，病人的呕吐物10份，可疑猪肉、羊肉标本15份，共55份样品，保存于无菌的三角烧杯中，供检测病原菌用。
2.2试剂及培养基
沙门氏菌用琼脂培养基， 志贺氏菌用琼脂培养基， 金黄色葡萄球菌所用的血平板培养基，使用7.5％NaCl肉汤增菌液、GN增菌液、四硫酸钠煌绿增菌液，由北京传桥技术有限责任公司生产，诊断血清、所有试剂、培养基和增菌液均在有效期内。
2.3检验方法
按GB/T4789-2003《食品卫生微生物检验》和GB17012-1997《感染性腹泻的诊断标准及处理原则》的相关方法[1,2]，将55份样品分别进行沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌分离培养[3]。
2.3.1 增菌 将样品分别转种于7.5％的NaCl肉汤培养基、应克氏肉汤培养基及GN增菌液内，37℃培养箱中培养24h，另取样品接种于四硫酸钠煌绿培菌液中，于42℃培养24h。
2.3.2分离培养
分别取增菌液划线接种于在SS、伊红美兰琼脂、WS、亚硫酸铋琼脂、血琼脂平板上，于37℃24h培养。在血平板上生长白色、扁平、表面光滑、周围无溶血的菌落，在SS平板和伊红美兰琼脂平板生长无色透明圆形，表面光滑的菌落，在亚硫酸铋琼脂平板上菌落为黑色有金属光泽，周围培养基为棕色，WS平板上的菌落为蓝绿色，中心为黑色。
2.3.3染色镜检
从平板上挑取菌落进行革兰氏染色镜检，为革兰阴性小杆菌，无芽孢。
2.3.4 生化试验
根据菌落特征及镜检情况，挑取可疑菌落接种在三糖铁琼脂，经37℃，24h培养，结果斜面(-)、底部(+)，产生H2S产气(-)。将可疑菌落接种在生化匣中经37℃，24h培养。结果见表1。
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2.3.5血清学鉴定
取待检菌落进行血清玻片凝集试验结果如下：
沙门氏菌血清A-F多价血清凝集：+++；Vi因子血清凝集阴性；生理盐水对照为阴性。
3结果
共检测55份标本，通过革兰氏染色镜检生化反应，血清学反应，菌落的形态等实验，可判定其中41份检出沙门氏菌，未检出志贺菌、致病性大肠埃希菌和变形杆菌等。其中病人的呕吐物中检出两株沙门氏菌，排泄物检出两株沙门氏菌，烧烤前后的猪、羊肉中检出沙门氏菌，其余食物如水煮花生、毛豆中未检出沙门氏菌。
4讨论
沙门氏菌属革兰氏阴性致病菌，常存于畜禽的肉，蛋，乳，剩饭等食品中，它是世界范围内导致食源性疾病的主要致病因子之一，在我国也占细菌性食物中毒的首位。据报道[4]，在我国70％～80％的细菌性食物中毒是由沙门氏菌引起的，而其中90％以上引起中毒的是动物性食品。
沙门氏菌在自然界中分布广泛，20～30℃环境下，可以迅速繁殖，易污染食品，是引起食物中毒的主要病原菌。依据流行病学调查，该烧烤摊前几天冰柜停电，所有的肉类长时间暴露在室温环境下，感染了沙门氏菌，摊位老板将变质的肉掺到正常的肉里，烧烤后并没有将其中的细菌完全杀死，因此食用后患者出现不同程度的恶心、呕吐、腹痛、腹泻、发热等急性胃肠炎症状，导致了由沙门氏菌引起的胃肠道型食物中毒[5]。
事件发生后，接诊医院按食物中毒救治处理原则对中毒病人进行对症治疗，现病人已基本痊愈，未有不良后果。同时食品安全监督部门已对该摊位老板进行相应的处罚。本次食物中毒事件提示：食品加工者务必保证分开存放生熟食物，加工时注意卫生，避免交叉污染，防止食品受到致病菌污染。食品安全监管部门应进一步加大对生产加工、流通环节食品卫生的监管力度，加强对食品加工人员是否持有健康证、培训合格证上岗情况进行监督。时值夏季，食品安全监管相关单位还要加强预防食物中毒健康宣传，提高群众的食 品安全意识。
参考文献
[1]中华人民共和国卫生部.食品卫生微生物检验方法[S].GB/T 4789-2003.
[2]中华人民共和国卫生部.感染腹泻的诊断标准及处理原则[S].GB17012-1997.
[3]韦宏珍,张艳琼,梁秀媛.一起中学生食物中毒流行病学调查和实验室检测分析[J].医学动物防制,2014,30(12):1412-1414.
[4]高春玉.一起交叉污染所致沙门氏菌食物中毒流行病学调查分析[J].中国卫生监督杂志, 2011,18(3):135-137.
[5]吴坤.营养与食品卫生学[M].人民卫生出版社,2006:365-366.
作者资料:马秀新(1964-),男,汉族，山东庆云人，主管医师，研究方向公共卫生
作者单位:庆云县疾病预防控制中心，山东省庆云县光明路18号，253700
论文作者:马秀新
论文发表刊物:《世界复合医学》（下）2015年第1卷总第4期
论文发表时间:2015/7/10
标签：沙门氏菌论文; 食物中毒论文; 菌落论文; 琼脂论文; 培养基论文; 检出论文; 流行病学论文; 《世界复合医学》（下）2015年第1卷总第4期论文;