包怡红[1]2001年在《乳清多肽及其发酵制品的研究》文中提出乳清是生产干酪和干酪素的副产物，其营养物以干基物质计占原料奶的55％。尤其是其中的蛋白质效价比值高达3.0。本课题以全乳清粉为原料，将乳清蛋白用酶水解，对发酵水解产物的乳酸菌、酵母菌性质和条件进行研究，进而研制低醇度的多肽乳清酒。以及乳清多肽乳酸菌饮料。 将乳清蛋白用碱性蛋白酶和胰蛋白酶水解，通过正交试验，得出各自的最优水解条件：碱性蛋白酶[E/S]=5％、T=60℃、pH=8.O，水解度21.6％；胰蛋白酶：[E/S]=5％、T=34℃、pH=8.0，水解度达19.4％，碱性蛋白酶水解乳清蛋白的能力较大，选为本试验用酶。研究表明：水解物在酸和乙醇作用下，溶解性与水解度成正相关。 用碱性蛋白酶水解乳清采用叁因素二次旋转正交回归设计，建立了二次旋转正交回归设计模型为y=18.85+1.05x_1+1.96x_2+2.03x_3-1.20x_2~2-1.35x_3~2-1.16x_2x_3，通过F检验，t检验和应用验证，该模型可以很好的反映碱性蛋白酶水解乳清蛋白反应体系运行的真实规律，而且与实际情况吻合较好（P＞0.05）。叁个因素对乳清蛋白水解度的影响顺序是：pH＞T＞[E/S]。其最优水解条件为：[E/S]=6.68％、T=61℃、pH=8.0、水解时间为120min，水解度达22.8％。 经水解后的乳清蛋白溶解性和稳定性均得到提高；用阳离子交换树脂和阴离子交换树脂对水解液进行脱盐处理，脱盐率可达到77.1％以上，两步脱盐处理后，蛋白回收率为81.8％以上；水解液有轻微的苦味，用β一环状糊精进行包埋处理可以掩盖苦味。 将乳清水解液用五株酵母菌分别发酵，优选出产醇量高和风味较好的叁株酵母，以此为发酵剂进行混合发酵，确定最佳组合为酵母菌A:K:C=1:1:1。为了进一步提高乙醇产量，添加酵母菌促生长因子。结果表明，添加葡萄糖，至总糖量达到12％，不仅乙醇产量提高，而且风味得到改善。 通过叁因素叁水平的正交试验，确定最优发酵条件：接种量为8％、起始pH值为6.5、温度为28℃；通过发酵期间乙醇、残糖量动力学研究，得出发酵60h，乙醇产量可达到3.95％以上。 多肽乳清酒的风味采用正交试验调配，经感官鉴定最佳基本调配方案是：酸量为0.1％、糖量为7％、β一环状糊精为0.6％。 乳清水解液利用乳酸菌发酵的培养条件为：保加利亚乳杆菌：嗜热链球菌=1:1，接种量3％，温度T为42℃，培养时间为4h。以乳酸菌发酵底物为基料，稀释一倍后，进行多肽双歧乳酸菌饮料调配。运用四因素叁水平的正交试验设计，研制饮料配方，饮料的最佳基本配方为：酸量为0.1％、糖量为9％、β一环状糊精为0.6％、低聚糖为4％。
尤玉如, 何光华, 刘士旺[2]2006年在《乳清生物发酵及其制品的研究》文中研究表明选用1~2∶1比例的保加利亚乳酸杆菌和链球菌菌种,对乳清进行发酵,研究生产具有生物活性的乳清饮品。研究结果表明,乳清发酵的优化工艺条件为发酵温度42℃、接种量3%、发酵终点75°T,稳定剂PGA和CMC混合协同增效的最佳比例为1∶3,发酵产品的感官指标、理化指标和微生物检测指标符合标准。
李锐达[3]2010年在《乳清抗氧化肽的制备及其生物活性研究》文中研究指明乳清是工业生产干酪及干酪素的副产品,具有丰富的营养价值,利用微生物发酵法制备生物活性肽,对于乳清资源的开发具有十分重要的意义。本论文利用乳酸菌发酵法制备乳清抗氧化活性肽,从发酵菌株的筛选到发酵条件的优化、乳清多肽的分离纯化及抗氧化活性检验进行了系统的研究。主要研究内容如下：1.本论文采用液态发酵法,以水解度和氧自由基清除率为指标,从实验室保存的6株乳酸菌中筛选出2株并建立了二元混菌体系。2.采用单因素实验和正交实验优化了乳清抗氧化活性肽发酵工艺,得到最佳工艺条件为：接种量5%,菌种比1：1,发酵温度37℃,初始pH值6.4,时间16h,此时测得乳清水解产物O2·-清除率为39.45%,水解度为9.75%,肽含量为2.62mg/mL。3.乳清抗氧化活性肽发酵液经6000Da膜超滤后冷冻干燥,溶解,经SephadexG-25凝胶层析柱分离纯化得到两个组分,相对分子量分别为2031Da、328Da。超滤分离的工艺条件为：操作压力0.04MPa、超滤温度25℃、超滤时间12min。与超滤液相比,透过液的氧自由基清除率提高了约29.5%,两个组分的氧自由基清除率分别提高了25.5%和39.0%。4.体外抗氧化实验结果显示：乳清多肽具有一定的总还原能力,呈现一定的量效关系；乳清多肽的总抗氧化能力随浓度增加有较大提高,浓度由2mg/mL增加到10mg/mL时总抗氧化能力提高了近2.3倍；对羟自由基、氧自由基和DPPH自由基均有清除作用,并且清除率都与浓度有关,其半数抑制浓度IC50分别为6.31mg/mL,·6.59mg/mL,6.07mg/mL。5.动物实验结果显示：乳清多肽中、高剂量组与衰老模型组比较,可显着提高衰老小鼠机体抗氧化酶CAT、SOD和GSH-Px的活性,明显降低衰老小鼠脂质过氧化代谢产物MDA水平,其中对血清的抗氧化作用最强;乳清多肽低剂量组则没有显着差异。实验结果说明乳清多肽具有提高衰老小鼠机体抗氧化的能力。
玛丽娜[4]2014年在《乳清醋的制备及其动物免疫功能性研究》文中进行了进一步梳理乳清是用牛乳生产干酪、干酪素过程中所产生的副产品,具有乳糖、乳清蛋白、矿物质、维生素等多种营养成分,且具有多种生理功能特性。但是,由于乳清中干物质相对含量低,开发利用技术复杂,设备昂贵,大量的乳清往往被干酪生产企业当作废水排泄掉,不仅造成资源的浪费,也污染了环境。因此,为了科学的开发和利用乳清资源,本论文研究了乳清的深度发酵制品—功能性乳清醋。功能性乳清醋不仅符合当前人们日益增强的营养保健需求,而且还可以将干酪工业副产物变废为宝,为干酪工业乳清的去向问题提供了新思路。目前有关乳清醋的研制问题国内未见有相关报道,国外这方面的研究报道也较少,论文研究了乳清醋的发酵工艺条件,并且对其风味物质及部分营养成分进行了分析研究。通过动物试验研究,揭示了本研究制备的乳清醋具有显着增强免疫力的功能。具体研究方法和结果如下：1.乳清醋的发酵试验采用Plalckett-Burman试验设计,确定影响酒精发酵及醋酸发酵过程的重要因素,采用最速上升试验方法确定影响酒精发酵及醋酸发酵过程的最优因素水平,最后用B6-Behnken试验设计确定了两个发酵过程的最优发酵条件。试验结果如下,酒精发酵条件为：A马克斯克鲁维酵母接种量为4×106cfu/ml;B酿酒酵母接种量为4.5×106cfi/ml;C发酵时间为151h；D鼠李糖乳杆菌接种量为2×106cfu/ml;E德氏乳杆菌接种量为2×106cfu/ml;F温度为40℃；G糖度为14%；H初始pH6.1；I姜粉用量为0.095(g/100ml)；醋酸发酵条件为：A温度为30℃；B初始为pH5.7:C酒精度为7.0；D发酵时间617；E醋杆菌接种量为6.5×106cfu/ml;F巴氏醋杆菌接种量为6.5×106cfu/ml;2.风味物质及营养成分分析试验采用顶空固相微萃取-气质联用技术对乳清醋的挥发性风味成分进行了分析,试验共测得36种化合物(匹配度80%以上),7大类化合物,其中酯类物质5种,酸类5种,酮类4种,醇类10种,醛类6种,酚类2种,烷烃类4种。通过氨基酸分析仪分析游离氨基酸含量发现25种氨基酸,其中包含8种人体必需氨基酸和4种具有增强免疫功能作用的氨基酸,有赖氨酸、苏氨酸、精氨酸、丝氨酸等。通过对乳清醋中矿物质及维生素的试验测定,在16种成分中,除了乳清醋当中氯和钠的含量远低于白米醋和苹果醋,Fe含量略低于白米醋和苹果醋,其它13种成分(钾、钙、镁、锌、锰,碘、磷、硒、VB1，VB2、Vc、VA、VE)的含量均高于白米醋和苹果醋。3.通过动物试验研究了乳清醋对小鼠免疫功能的促进作用,具体内容包括以下几方面：(1)脏器／体重比值测定试验：与对照组相比,高、中两个剂量组的乳清醋能显着增强小鼠的免疫器官重量、胸腺指数及脾脏指数(P<0.05)。(2)二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应试验：与对照组相比,高、中、低叁个剂量组的耳肿胀度均有显着性差异(P<0.05),说明乳清醋能显着提高小鼠迟发型超敏反应。(3) ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验：与对照组相比,高、中、低叁个剂量组的乳清醋对促进淋巴细胞增殖均有极显着地影响(P<0.01)。.(4)抗体生成细胞检测：与对照组相比,乳清醋各剂量组对小鼠抗体细胞生成没有显着地影响。(5)血清溶血素测定试验：与对照组相比,乳清醋各剂量组对小鼠的血清溶血素没有明显的影响,抗体生成水平也无显着性差异。(6)小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验：与对照组相比,高、中两个剂量组的乳清醋对增强小鼠巨噬细胞的攻击和吞噬能力有极显着地影响(P<0.01)。(7)小鼠中的碳廓清试验：与对照组相比,高、中、低叁个剂量组的乳清醋均可显着增加小鼠的吞噬指数。(P<0.05)(8)NK细胞活性测定：与对照组相比,高、中、低叁个剂量组的乳清醋对增强NK细胞活性有极显着地影响。(P<0.01)本研究论文得出的结论是,以乳清为原料,采用液态发酵方法,经过酒精发酵和醋酸发酵过程可成功制得乳清醋。乳清醋含有的营养物质丰富于普通白米醋和苹果醋,且风味物质浓厚。经过动物试验证明乳清醋具有增强小鼠免疫功能的作用。
张媛媛[5]2007年在《羊奶乳清蛋白的酶解及羊奶乳清饮料研制》文中研究说明本文主要研究了羊奶乳清蛋白的最佳酶解工艺、水解液的稳定性及羊奶乳清饮料的研制。确定了水解羊奶乳清蛋白的最佳双酶组合、酶解羊奶乳清蛋白的最佳工艺参数、最佳脱苦条件以及羊奶乳清饮料的最佳风味配方和加工技术，并对羊奶乳清水解液的pH稳定性和对热稳定性及羊奶乳清饮料的贮藏稳定性进行了探讨。分别采用Alcalase(碱性蛋白酶)、Protamex(复合蛋白酶)和Flavourzyme(复合风味蛋白酶)水解羊奶乳清蛋白，以水解度和苦味值为评定指标，确定各蛋白酶水解的最佳工艺参数。结果表明：叁种蛋白酶在其最适条件下水解羊奶乳清蛋白，水解度由大到小依次为Protamex 34.78％＞Alcalase 29.23％＞Flavourzyme 26.05％；苦味值大小依次为Alcalase＞Protamex＞Flavourzvme，其中以Flavourzyme产生的苦味最小，口感最好。在单酶水解的基础上，以水解度和苦味值为评定指标，研究双酶复合水解羊奶乳清蛋白的最佳组合。结果表明：双酶复合分步水解羊奶乳清蛋白，水解效果优于单酶水解；特别是先添加Alcalase后添加Flavourzyme水解，水解度可高达35.83％；其次为先添加Protamex再加入Alcalase，水解度为35.53％；先添加Flavourzyme后加入Alcalase的水解度为32.81％，且该组合水解液口感良好，因此选取先加入Flavourzyme后加入Alcalase的水解液作为生产羊奶乳清饮料的母液。论文对羊奶乳清水解液的pH稳定性及对热稳定性做了研究。研究表明：羊奶乳清蛋白经水解后，其pH稳定性和对热稳定性较羊奶乳清均有了明显的提高。利用β-环糊精对羊奶乳清水解液进行掩盖脱苦，确定了β-环糊精的最适用量为0.6％，此时水解液无苦味。取经过脱苦的羊奶乳清水解液进行饮料配制，通过单因素试验和正交试验确定了羊奶乳清饮料最佳风味配方为：蔗糖添加量6％，混合酸(柠檬酸：苹果酸=1：1)添加量0.30％，蜂蜜添加量1.33％；同时，确定了羊奶乳清饮料的最适杀菌条件为85℃、30min；产品贮藏稳定性良好。
黄玉凤[6]2012年在《乳清茶饮料的综合》文中研究说明本研究对内蒙古正蓝旗长虹乳品厂生产高水分Mozzarella干酪排出的乳清进行了研究及再利用。将乳清与茶汁相结合,通过单因素及正交实验确定了此饮料的最佳配方及生产工艺。茶叶浸提的最优条件为：95℃,11min.直接调配型乳清茶饮料的最佳配方为：柠檬酸的添加量为0.0375%,糖的添加量为7.5%,稳定剂(黄原胶和CMC质量比1：1)的添加量为0.100%。发酵型乳清茶饮料的最佳配方为：发酵剂的添加量为0.0085%、茶汁的添加量为37.5%、白砂糖的添加量为6.25%、稳定剂的添加量为0.075%。胰蛋白酶水解乳清蛋白的最适处理条件：温度为40℃,时间为6h,酶的添加量为0.4%,乳清蛋白的水解度可达16.7%。乳清多肽茶饮料的最佳配方为：茶汁的添加量为50%,白砂糖的添加量为7.0%,柠檬酸添加量的为0.04%,稳定剂的添加量为0.10%。
朴姗善[7]2012年在《乳清抗氧化肽的工艺探索与活性分析》文中指出生物活性肽作为对人体健康具有重要促进作用的功能因子已成为当前国内外最热门的研究课题。以乳蛋白为原料制备的生物活性肽在具有功能性的同时还可以提供额外的营养价值，因此具有相当的发展前途。乳源抗氧化肽是一种具有清除自由基，抑制脂质过氧化能力的天然活性肽。对其进行深入的研究，在食品防腐、疾病防治、延缓衰老以及功能食品研发方面具有重要意义。干酪生产过程中会析出大量的乳清，其主要成分为乳清蛋白。乳清蛋白中的氨基酸种类齐全，含量丰富，营养价值很高。利用乳清制备抗氧化肽可将干酪生产的副产物变废为宝，充分利用乳清的营养成分，减少了环境污染；乳清活性肽增加乳制品的附加价值，可作为功能保健食品的开发，具有很高的健康效益和经济效益，从而促进了乳品工业的发展。本研究以乳清浓缩蛋白粉（WPC80）为原料，对乳清抗氧化肽的制备工艺进行了探索，对其工艺条件进行优化；对制备的乳清抗氧化肽进行超滤分离并对其抗氧化活性进行了分析。主要结果如下：⑴设计了利用胰蛋白酶酶解乳清蛋白制备抗氧化肽的工艺流程，通过单因素实验，以DPPH自由基的清除率为测定指标，确定了乳清蛋白酶解物最佳工艺条件为：底物浓度3%（W:V），酶解时间90min，酶解温度50℃，pH值：8.0，加酶量：2%，在此基础上，进行进一步的优化，确定最佳的酶解条件。⑵筛选出3个对乳清蛋白酶解物抗氧化活性影响较大的重要因素：反应温度（A）、pH值（B）、加酶量（C），利用Box-Behnken响应面实验得到回归方程：Y(DPPH自由基清率)=45.79-4.32A+2.91B-1.42C+3.71AB+3.21AC+0.43BC-6.57A2-5.08B2-5.66C2。在此基础上确定了叁者的最佳值：控制酶解温度：48.31℃，pH值：8.08，加酶量：1.78%，酶解产物对DPPH自由基清除率的理论值为46.90%，对结果进行验证实验，得清除率为47.76%，证实结果准确、可靠，具有统计学意义。⑶设计了微生物法制备乳清抗氧化肽的工艺流程，将保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌的培养24h后，以1:1的比例接种于乳清蛋白复原液中制备具有较强自由基清除能力的多肽。通过单因素实验，以DPPH自由基的清除率为测定指标，确定了乳清蛋白发酵产物最佳工艺条件为：10%乳清复原液，发酵时间：24h，发酵温度：37℃~47℃，初始pH值：6.0~6.8，接种量：3%~5%，在此基础上，进行进一步的优化，确定最佳的发酵条件。⑷筛选出3个对乳清蛋白发酵产物抗氧化活性影响较大的重要因素：反应温度(A)、初始pH值(B)、接种量(C)，利用L9(33)正交表进行培养优化实验方法，得到最佳的发酵培养条件：10%乳清蛋白复原乳在37℃，初始pH值6.8，接种量4%条件下发酵24h。在该条件下，发酵产物对DPPH自由基的清除率为66.95%。⑸对乳清蛋白酶解产物和乳清蛋白发酵产物进行了超滤分离，测定了不同相对分子质量的分级产物的抗氧化活性，确定了经截留相对分子质量为5KDa的膜片分离后，产物对DPPH自由基的清除率最高。对经过5KDa膜片超滤后的乳清蛋白酶解产物和乳清蛋白发酵产物进行了抗氧化活性的对比，发现发酵产物的抗氧化活性相对更高，对DPPH自由基清除率可达到79%，同时分析了造成这种现象主要是由商品酶的特异性和乳酸菌蛋白质酶系的多样性造成的。⑹经Tricine-SDS-PAGE电泳测定，乳清发酵产物具有抗氧化活性的小肽其分子量集中于小于2KDa范围内；而氨基酸分析仪的分析结果证明这些多肽中含有与抗氧化活性大小关系密切的疏水性氨基酸、芳香环氨基酸占总氨基酸含量的70%以上，显现显着的抗氧化活性。同时富含人体和儿童所需的必需氨基酸，营养成分丰富，适宜作为功能性食品的开发。⑺根据酶法和微生物法实验内容并结合国内外的相关研究报道，从工艺原理、工艺条件和最终产品的性质等方面对酶法和微生物法这两种制备乳清抗氧化肽的工艺进行了综合客观且全面的对比评价，得到微生物法制备乳清抗氧化肽在功能性食品的研发方面显示出一定的优势的结论，并由此对乳清抗氧化肽功能食品的研发进行了合理的展望。⑻对乳清抗氧化肽的活性进行对比分析，发现实验室利用微生物法制备的乳清蛋白发酵产物的抗氧化活性明显高于乳清原液和市售凝固型酸奶；市售酸奶亦现实出一定的抗氧化活性，乳清原液抗氧化活性较低。引导我们在未来利用乳清研发一种具有抗氧化活性的功能饮料产品，而如何在较低成本的前提下提高乳清蛋白或其产生多肽的浓度是成功的关键。
杨媚[8]2011年在《应用萌发大豆制备益生菌发酵豆乳的研究》文中研究说明本文在项目组前期研究的基础上,采用瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus B02)、保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus AS1.1482)和嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus IFFI 6038)作为组合益生菌发酵剂,以萌发大豆为主要原料制成发酵豆乳,系统地研究了产品的酸度、质构、流变特性、微观结构、持水力、感官特性和贮藏稳定性,以及萌发大豆改善产品品质的机理。研究了不同蛋白原料对发酵酸乳酸度、质构、流变特性及微观结构的影响。结果表明,在豆乳中添加30 %的牛乳制成混合乳,能促进乳酸菌的增殖产酸。与发酵纯豆乳相比,发酵混合乳的硬度、粘附性及胶性显着下降,粘弹性流变行为也明显下降,并且显示出较弱的剪切稀化作用。与发酵纯豆乳的凝胶网络结构相比(孔径约0.5 ~ 1μm),发酵混合乳凝胶网络更疏松,孔径增加至2μm左右。研究了不同萌发程度的大豆对发酵豆乳酸度、质构、流变特性及微观结构的影响。结果表明,与未萌发大豆制成的发酵豆乳(S_0发酵豆乳)相比,大豆萌发至3 cm(S_3)及6 cm(S_6)后,硬度和脆度分别下降了38.61 %和38.85 %,粘附性从71.77±10.53下降至31.94±2.04 (g·s)。萌发大豆发酵豆乳显示出较弱的粘弹性流变特性以及剪切稀化属性,其流动行为指数n从0.225显着增加至0.441(p<0.05),而屈服应力τ_0和稠度系数κ则分别从3.25 Pa和12.61(Pa·s~n)下降至1.98 Pa和8.37(Pa·s~n)(p<0.05)。此外,大豆萌发后,发酵豆乳的叁维凝胶网络变得更疏松及规则,其孔径从1 ~ 2μm显着增加至5 ~ 6μm。研究了萌发过程中大豆蛋白的降解情况及其内源蛋白降解酶系的变化情况。结果显示,大豆在萌发过程中,7S蛋白的α'、α亚基及11S蛋白的酸性亚基逐渐被降解,游离氨基酸总含量从515.78增加至880.75(μg/mL),某些必需氨基酸如组氨酸(His),苏氨酸(Thr)等含量也明显增加。萌发大豆内源蛋白酶解系统的活性,基本随着萌发程度的增加而增加,其中酸性及中性蛋白酶活性明显高于碱性蛋白酶的活性;萌发大豆内源内肽酶对合成底物NBZ-Gly-Pro-Arg-pNA显示出较高的催化活性,而氨肽酶则对合成底物Ala-pNA及Leu-pNA显示出较高的水解活性,羧肽酶对羧基末端含有疏水性氨基酸残基的底物显示出极低的催化活性。研究了应用萌发大豆制备的发酵豆乳产品的品质及贮藏稳定性。结果显示,萌发大豆发酵豆乳的持水力均达到87 %以上,且乳酸菌总数高达10~8 CFU/mL以上。在4℃贮藏3周后,发酵豆乳的乳酸菌含量仍能保持在10~6 CFU/mL以上,且pH、酸度、持水力、质构特性及蛋白质的降解变化并不明显,显示出较强的贮藏稳定性。大豆萌发至3 cm制成的发酵豆乳,其感官品评的总体可接受性最高。
韦慧娟[9]2013年在《乳清蛋白酶解物对干酪乳杆菌生长影响的研究》文中提出益生菌是指投入后通过改善宿主肠道菌群生态平衡而发挥有益作用，达到提高宿主健康水平的活菌制剂及其代谢产物。益生菌在货架期内的活菌数目不得少于106CFU/mL，否则不能起到预期改善宿主健康水平的作用。乳酸菌营养需求苛刻，但自身蛋白水解能力很弱。本研究选用乳清蛋白浓缩物（WPC80）为原料，以胰蛋白酶进行水解，探讨乳清蛋白水解物对干酪乳杆菌的促生长作用，希望能找出乳清蛋白水解物中促进干酪乳杆菌生长的主要成分，同时为乳清蛋白的有效利用、干酪乳杆菌高效培养技术的完善提供一定的理论依据。1.经对干酪乳杆菌生长特性的研究可以得知干酪乳杆菌4h以后进入对数生长期，12h以后到达对数生长期的末期。2．利用胰蛋白酶水解乳清浓缩蛋白80，选水解温度（℃）、pH、底物质量浓度（g/100ml）、酶与底物浓度比E/S(%)为影响因素，水解度为指标。单因素试验确定出较优因素范围后，采用L9(34)正交表，设计正交试验。结果表明水解温度53℃，pH8.0，E/S3%，底物质量浓度4.0g/100ml条件下，DH达12.67%。3.添加乳清蛋白酶解液（WPH）的组，活菌数较对照组（MRS）均有显着增加，尤其添加水解时间5h和7h的WPH促生长效果更显着。SDS-PAGE电泳分析表明了随水解时间的增加，蛋白逐渐被酶解成小的片断；超滤部分均表现了增菌作用，分子量3KD以下的酶解产物促生长作用最强。4.以上研究发现乳清蛋白酶解液对干酪乳杆菌有不同程度的促生长作用，基于以上研究，又比较了不同替代量乳清蛋白水解液对干酪乳杆菌生长的影响。结果表明：替代量为40%时，对干酪乳杆菌的促生长作用最为显着，对数生长期的末期活菌数分别高达8.58log CFU/mL。甚至达70%替代量时，活菌数与对照组之间的活菌数数量也相当。
邢美孜[10]2010年在《利用德氏保加利亚乳杆菌发酵脱脂乳生产生物活性肽及其体外生理功能初步研究》文中研究指明乳源生物活性肽是一类由2-20aa组成的短肽段,它能对机体健康产生积极影响,例如,抗高血压、免疫调节、抗氧化等。这些短肽通常隐匿在母体蛋白中,需要通过微生物发酵或蛋白酶水解的方式释放后,才能发挥相应的活性。但发酵产物和酶水解产物成份非常复杂,所以从其中分离纯化得到这些活性非常困难。因此,全面评价益生菌的发酵乳制品的产肽组分的体外生理活性,对衡量发酵乳制品的营养价值提升具有重要的意义。本文利用德氏保加利亚乳杆菌LB340 LYO,对脱脂乳进行了发酵,从发酵工艺的优化、小肽组分的分离纯化和体外生理功效评价等方面进行了探讨,为利用德氏保加利亚乳杆菌LB340 LYO生产功能肽乳制品奠定了基础。主要研究结果如下:1)根据目标小肽的来源和分子量分布对小肽浓度测定的标准物进行筛选,最终确定酪蛋白的胃蛋白酶水解产物Peptone为最适标准物,建立了乳源小肽的浓度相对准确的测定方法:Peptone-Folin酚法。其标准曲线方程为Y=0.48158X,其中Y为吸光值,X为混合小肽浓度。线性相关系数R=0.99936,说明结果具有很好的相关性,可用于样品浓度的测定。2)以产肽量和目标区段小肽丰度为指标,从菌种配比、发酵时间和后熟工艺叁个方面对德氏保加利亚乳杆菌LB340 LYO发酵工艺进行了优化,最后确定其最佳产肽条件为:单一LB340 LYO菌株,42°C培养16h,不采用后熟工艺。3)利用离心、超滤、凝胶层析和反相高效液相色谱对发酵产物中的小肽组分分别进行了分离与纯化,获得的≤1kDa的小肽的组分的浓度为3.655μg/μL。对1kDa样品进一步凝胶层析分离,获得F1-F6六个组分峰,其中F2组分表现出最高的ACE抑制活性,其半抑制浓度为67.79μg/μL。通过RP-HPLC对F2进一步分离,得到四个组分F2-1、F2-2、F2-3和F2-4。在2μg/mL的浓度下均表现出良好的ACE抑制活性,其抑制率为22.19%、24.35%、21.66%和18.77%。MTT实验表明,≤1kDa超滤液对小鼠淋巴细胞增殖有正向刺激作用,进一步分离得到得F1、F3、F4、F6组分能够刺激小鼠脾脏淋巴细胞的增殖,其刺激指数(SI)分别为0.014、0.096、0.646和0.729。然而,F5组分具有明显的负调控影响,表明样品具有一定的抗超敏反应作用。此外这些按分子量分级超滤分离样品的抗氧化实验结果表明,各级超滤液都能够清除[DPPH*]自由基,其中作用最高的为5kDa超滤产物,自由基清除率达65.98%,显着高于其他组分。FRAP分析表明相同样品也具有一定的还原力,但未见其与抗氧化能力之间有明显的相关性,这可能有它们的反应原理差异有关。
参考文献：
[1]. 乳清多肽及其发酵制品的研究[D]. 包怡红. 东北农业大学. 2001
[2]. 乳清生物发酵及其制品的研究[J]. 尤玉如, 何光华, 刘士旺. 浙江科技学院学报. 2006
[3]. 乳清抗氧化肽的制备及其生物活性研究[D]. 李锐达. 东北林业大学. 2010
[4]. 乳清醋的制备及其动物免疫功能性研究[D]. 玛丽娜. 内蒙古农业大学. 2014
[5]. 羊奶乳清蛋白的酶解及羊奶乳清饮料研制[D]. 张媛媛. 陕西师范大学. 2007
[6]. 乳清茶饮料的综合[D]. 黄玉凤. 内蒙古农业大学. 2012
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