史明艳[1]2003年在《牛双肌基因多态性分子标记研究》文中研究说明MSTN基因又称GDF-8(growth differentiation factor 8，肌肉生长抑制素)，是一种肌肉生长的负调控因子，属于TGF-β(transfoming grouth factor beta，转化生长因子β)超家族，在发育和成熟的骨骼肌中特异表达。MSTN基因的保守的功能区的碱基发生突变，该基因的表达产物失活，从而丧失抑制肌肉生长的功能，使肌肉过度发育和表达。 本文研究了我国南阳牛、秦川牛以及国外引入品种皮埃蒙特牛双肌基因的多态性及其与生产性状的关系，目的在于寻找牛瘦肉率的分子标记，从而为牛的育种提供一种新的途径和方法。实验以具有表型“双肌”性状的纯种秦川牛30头、南阳牛45头、皮埃蒙特牛35头为实验材料，对牛MSTN基因的第叁外显子进行了PCR-SSCP分析，对具有SSCP多态性的片段进行了克隆和测序，找出了等位基因的多态位点，分析了牛双肌基因SSCP多态性与牛产肉性状之间的关系，结果表明： (1) 经PCR-SSCP分析，发现南阳牛第叁外显子扩增片段对应的基因编码区存在多态性，该区域存在两种基因型AA和AT型，等位基因A和T的频率分别为0.9889、0.0111。 (2) 经PCR-SSCP分析，发现皮埃蒙特牛第叁外显子扩增片段对应基因编码区存在多态性，表现出两种基因型AA型和AT型，A和T的基因频率分别为0.9857、0.0143。这与Mc等的实验结果一致。 (3) 经PCR-SSCP分析，发现在我国秦川牛MSTN基因扩增片段对应的第叁外显子处不存在多态性。 (4) 南阳牛、皮埃蒙特牛、秦川牛A和T基因频率分析说明等位基因A在各个群体中占的比例较大，而等位基因的频率很小，几乎为0，这说明“双肌”基因在第叁外显子处突变的几率很小。同时可看出皮埃蒙特牛具有较高的T等位基因频率，说明皮埃蒙特牛中双肌存在的几率较大。 (5)以南阳牛、皮埃蒙特牛为实验材料，分析MSTN基因第3外显子的SSCP多态性与体重性状的关系，经方差显着检验结果表明：MSTN基因外显子3的多态性与出生重、18月龄体重呈显着相关(P＜0.05)。突变基因型AT和出生重、18月龄体重呈显着相关(P＜0.05)。 (6)对南阳牛、皮埃蒙特牛具有SSCP多态性的片段进行了克隆测序，测序结果表明，MSTN基因第叁外显子在938处发生了单碱基的突变：G→A，导致导致编码的氨基酸由保守的半胱氨酸突变为酪氨酸，导致MSTN蛋白失活。 (7)本实验首次在我国地方黄牛品种南阳牛中发现双肌个体。 (8)建立了牛双肌个体检测的PCR-SSCP方法。
李绍华[2]2001年在《猪MSTN基因多态性及分子标记的研究》文中进行了进一步梳理对猪肉用性状育种的目标主要集中在瘦肉量和肉质上，其中对瘦肉量的追求一直是科学家和生产者努力的重点。双臀基因(Myostatin，MSTN)属于TGF-β(Transforming Growth Factor-β)超家族，在发育和成熟的骨骼肌中特异表达，其表达产生肌肉生长抑制因子GDF—8(Growth／differentiation Factor-8)t GDF—8因子抑制肌肉的生长和分化。MSTN基因的保守区域的碱基发生突变，则它表达的产物就会丧失抑制肌肉生长的功能，或该产物的抑制功能受到影响，从而肌肉得以过度的发育和生长。本文研究了猪MSTN基因的多态性及其与生产性状的关系，目的在于寻找猪瘦肉率的分子标记，从而为猪的育种提供一种新的途径和方法。 以66头加系“双肌臀”大白猪、20头丹系大白猪为实验材料，对猪MSTN基因外显子2和外显子3采用了3对引物进行PCR—SSCP多态性分析，并且，对具有SSCP多态性的片段进行了克隆和测序，找出等位基因的差异位点。 以47头“双肌臀”大白猪为实验材料，研究了猪MSTN基因SSCP多态性与生产性状(背膘厚、瘦肉率)之间的关系。 本实验得出结果如下： 1．经3对引物的PCR—SSCP分析，发现在猪MSTN基因的外显子2和外显子3中存在SSCP多态性。在外显子2中表现出3种基因型CC、CT和TT，“双肌臀”大白猪中等位基因C和T的频率分别为0.417和0.583，丹系大白猪分别为0.225和0.775；在外显子3中表现出2种基因型GG和AG，“双肌臀”大白猪中等位基因A和G的频率分别为0.341和0.659，丹系大白猪分别为0.300和0.700。 2．对在外显子3表现SSCP多态性的MSTN基因扩增片段进行了克隆测序，测序结果表明，MSTN基因发生了单碱基的突变：即A~(1008)→G，该突变未导致氨基酸的改变，属沉默突变，但在该位点处产生了一个ApaI限制性内切酶位点。 3．对在外显子2表现SSCP多态性的MSTN基因扩增片段进行了克隆测序，测序结果表明，MSTN基因发生了单碱基的突变：即G~(480)→T，该突变未导致氨基酸的改变，属沉默突变。 4．在47头“双肌臀”大白猪中，分析了MSTN基因外显子2和外显子3的SSCP多态性与猪生产性状的关系。外显子2中的多态性：经方差分析表明，MSTN基因的多态性与猪的背膘厚、瘦肉率无显着性相关；外显子3中的多态性；经t显着性检验结果表明，MSTN基因的多态性与猪的背膘厚呈显着性相关(P＜0.04)，与猪的瘦肉率相关(P＜0.07)。 5．以“双肌臀”大白猪为实验材料，采用引物1进行PCR扩增，扩增产物用ApaI限制性内切酶消化，建立了猪MSTN基因PCR—RFLP分子标记技术。
吕文发, 杨连玉, 贺实伟, 杨雨江, 张嘉保[3]2010年在《中国西门塔尔牛、利木赞牛和夏洛莱牛MSTN基因多态性分析》文中研究表明分别以20头中国西门塔尔牛、利木赞牛和夏洛莱牛为研究对象,采用创造酶切位点PCR与降落PCR相结合的方法对3个品种的基因外显子1的突变位点扩增,分析了3个肉牛品种之间的Myostain(MSTN)基因多态性。运用1对特异性引物扩增3个肉牛品种的MSTN基因已知外显1SNP位点,扩增片段大小为217bp。运用CRS-RFLP方法鉴定60头牛MSTN基因在3个群体中的分布情况。结果表明,在西门塔尔群体中等位基因C占优势,等位基因频率为60%,AA基因型频率为0;在夏洛莱群体中等位基因A优势,等位基因频率为57.5%,CC基因型频率为0;而在利木赞群体中未检测到这一突变。
参考文献：
[1]. 牛双肌基因多态性分子标记研究[D]. 史明艳. 西北农林科技大学. 2003
[2]. 猪MSTN基因多态性及分子标记的研究[D]. 李绍华. 华中农业大学. 2001
[3]. 中国西门塔尔牛、利木赞牛和夏洛莱牛MSTN基因多态性分析[J]. 吕文发, 杨连玉, 贺实伟, 杨雨江, 张嘉保. 中国兽医学报. 2010