黑龙江省齐齐哈尔市第一医院 161000
摘要：目的 探讨乳腺癌组织中D2-40标记的淋巴管浸润与淋巴结转移的关系。方法 采用二步法免疫组化染色检测对我院2012年3月至2014年9月收集的30例乳腺良性病变及50例乳腺癌组织中D2-40的表达及其与淋巴管浸润及淋巴结转移的关系。结果 乳腺癌组与正常对照组D2-40阳性表达率的比较差异显著（P<0.05），乳腺癌患者中，淋巴结转移组淋巴管浸润阳性率显著高于为转移组（P<0.05）。结论 D2-40标记物染色效果好，标记淋巴管特异性较强，是可靠的淋巴管标记物。淋巴管浸润可作为判断患者病情进展及预后的重要依据。
关键词：乳腺癌；D2-40；淋巴管浸润；淋巴结转移
淋巴管是乳腺癌细胞转移到腋窝淋巴结的重要途径，通过淋巴管，癌细胞可转移至腋窝淋巴结，最终转移至区域淋巴结[1]。作为淋巴管内皮细胞特异性标记物，单克隆抗体D2-40是检测乳腺癌组织中淋巴管浸润情况的重要指标。为探究乳腺癌组织中D2-40标记的淋巴管浸润与淋巴结转移的关系，我院将30例乳腺良性病变组织与50例乳腺癌组织中D2-40的表达进行检测，并分析其与淋巴管浸润及淋巴结转移的关系。
1.资料与方法
1.1一般资料
收集我院2012年3月至2014年9月收治的50例乳腺癌患者作为研究对象，所有患者均符合乳腺癌诊断标准，排除资料不完整、术前接受放化疗及乳腺癌复发病例。患者均为女性，年龄分布为21-67岁，平均年龄为（48.3±1.3）岁；肿瘤直径为0.8-13cm，平均直径为（3.6±1.3）cm。23例出现腋窝淋巴结转移，27例未发生转移。随机选取同期30例乳腺良性病变作为对照，年龄分布为20-68岁，平均年龄为（48.6±1.1）岁；其中12例纤维腺瘤，18例乳腺腺病。
1.2方法
采用免疫组化法对两组D2-40进行检测，试剂盒为Envision，行二步法免疫组化染色，石蜡切片为2um，脱蜡至水，后采用柠檬酸缓冲液进行抗原修复，持续25分钟；采用双蒸水及PBS分别冲洗三次，每次3分钟。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆完成后利用过氧化氢阻断液孵育3分钟，将内源性过氧化物酶活性清除后再使用双蒸水、PBS分别冲洗三次，每次3分钟。滴加广州深达生物制品技术有限公司生产的D2-40一抗，在电热恒温培养箱中孵育1小时，温度为37℃。冲洗后滴加福州迈新生物技术开发有限公司生产的酶标羊抗鼠IgG聚合物二抗试剂，培育箱温度为37℃，孵化半小时后采用PBS进行漂洗。在室温下使用DAB试剂显色5分钟后，采用苏木素轻度复染1分钟，盐酸酒精分化6秒后脱水，采用中性树胶封固切片。胞浆或薄膜呈清晰的棕黄色或棕褐色颗粒为阳性表达，淋巴管腔内出现乳腺癌细胞判定为淋巴管浸润阳性[2]。
1.3统计学方法
采用统计学软件包SPSS15.0对本文所有数据进行比较和分析，计数资料采用百分比表示，组间比较采用χ2检验。P<0.05的差异具有统计学意义。
2.结果
2.1两组D2-40标记的淋巴管及淋巴管浸润分布特点
乳腺癌组均可见不同程度D2-40的阳性表达，良性对照组出现3例D2-40阳性表达，差异具有统计学意义（χ2= 88.6792，P=0.0000）。
2.2乳腺癌组织中淋巴管浸润阳性与淋巴结转移的关系
淋巴结转移组中淋巴管浸润阳性的有19例，未转移组11例，组间比较差异显著（χ2= 6.1333，P= 0.0133）。
3.讨论
肿瘤的侵袭及转移是造成癌症患者死亡的主要原因，大量临床实践证实，乳腺癌肿瘤血管的形成与淋巴结转移具有重要关系，同时淋巴管生成可促进乳腺癌肿瘤林霸道转移及发生、发展。D2-40是淋巴管内皮细胞标记物，可用于检测石蜡切片上肿瘤组织与正常组织中的淋巴内皮细胞，特异性及敏感性较高。本组研究中，乳腺癌组织中可见D2-40不同程度的阳性表达，阳性染色体在淋巴管内皮细胞膜及胞浆中呈棕黄色颗粒，D2-40标记的阳性脉管管壁较薄，形态不规则、大小不一，管壁多为单层扁平上皮，未见中性粒细胞及红细胞填充，符合淋巴管的形态特点，邻近可见腔内有不着色的血管。良性对照组乳腺组织中淋巴管的数量较少，且多为闭锁状。提示D2-40识别乳腺癌组织淋巴管的特异性较高，可作为乳腺癌淋巴管可靠的标记物。
本组研究中淋巴结转移组患者LVI阳性率显著高于未转移组，提示有淋巴结的患者，淋巴管更易出现癌细胞浸润。且乳腺癌LVI与淋巴结转移成正比关系，随着淋巴结转移数目的不断增多，淋巴管发生浸润的可能性更大。
综上所述，D2-40标记物染色效果好，标记淋巴管特异性较强，是可靠的淋巴管标记物。乳腺癌中淋巴管浸润与淋巴结转移密切相关，淋巴管浸润可作为判断患者病情进展及预后的重要依据。
参考文献：
[1]陈文静，张江宇，李文萍，等.乳腺导管癌演变过程中淋巴管密度变化的研究[J].中华肿瘤防治杂志，2012，18（10）：766-769.
[2]万琳琳，李志民，展瑞.D2-40标记的为淋巴管密度对乳腺癌淋巴结转移及临床分期的意义[J].现代医药卫生，2014，30（03）：334-336.
论文作者:曹维海
论文发表刊物:《健康世界》2015年1期
论文发表时间:2015/9/18
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