任志华[1]2003年在《急性白血病患者2号染色体错配修复基因连锁微卫星不稳定性研究》文中指出目的 研究急性白血病患者2号染色体错配修复基因连锁微卫星的不稳定性改变，以推断错配修复基因突变、缺失变化对于急性白血病发生、发展过程中的作用与意义。 方法 选取急性白血病患者骨髓及口腔黏膜细胞标本各53例，其中急性粒细胞白血病(AML)33例，急性淋巴细胞白血病(ALL)20例，另外收集慢性粒细胞白血病(CML)标本5例，骨髓异常增生综合征(MDS)3例。选取2号染色体上两个错配修复基因(hMSH2、hPMS1)连锁的四个微卫星位点(D2s123、D2s119、D2s117、D2s115)进行多重PCR扩增，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳／银染，观察微卫星不稳定性(microsatellite instability，MSI)及杂合性缺失(loss of heterozygocyte，LOH)发生情况，并进行分析。 结果 53例急性白血病患者中，MSI的检出率为69.8％(37／53)，共78例次。hMSH2附近的D2s123，D2s119位点分别有16例／22例发生MSI，发生率约为30.2％／41.5％；其中LOH的发生率分别为9.4％(5／53)，7.5％(4／53)。与hPMS1基因连锁的D2s117和D2s115两个位点，MSI的检出率为33.9％(18／53)，39.6％(21／53)；其中LOH则分别有7.5％(4／53)和9.4％(5／53)为阳性。四位点中D2s119位点的不稳定性表达率最高，AML患者中MSI发生率为36.4％(12／33)，ALL患者为30％(6／20)。此4位点在AML，ALL中的表达的差别均无统计学意义(查表法)。有2处或2处以上发生MSI(RER+)的有28例。4例初发CML均未检到微卫星异常改变，而1例加速期CML出现了3个位点的MSI。另一例MDS(RAEB-T)检出2位点的不稳定性变化。 讨论 急性白血病患者2号染色体上两个错配修复基因连锁微卫星均可检测到高频率的MSI和LOH，说明此错配修复基因的突变与急性白血病的发生、发展有关。多个位点的MSI现象说明急性白血病的发生是一个多部位、多步骤染色体突变累积的结果。
于燕霞[2]2004年在《5号染色体微卫星不稳定性与白血病和骨髓增生异常综合征关系的研究》文中研究指明目的 研究白血病和骨髓增生异常综合征患者5号染色体微卫星异常现象，以发现5号染色体是否存在与白血病发生相关的基因改变，并探讨其在白血病中的作用。 方法 选取82例恶性血液病患者骨髓及口腔黏膜细胞的DNA标本，其中急性粒细胞白血病(acute myeloid leukemia，AML)43例，急性淋巴细胞白血病(acute lymphoid leukemia，ALL)28例，慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia，CML)5例，骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome，MDS)6例。在5号染色体上选取5个微卫星位点，即5q21附近的D5s346、D5s409和5q31上的D5s393、D5s399、D5s476，应用多重PCR-聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染技术，对患者骨髓细胞DNA与自身口腔黏膜细胞DNA进行对照比较，观察电泳产物的微卫星不稳定性(microsatellite instability，MSI)和杂合性缺失(loss of heterozygosity，LOH)情况。 结果 82例白血病和MDS患者中，共55例(67.1％)、93例次发生了至少一个位点的微卫星不稳定性，25例(30.5％)发生了LOH。43例AML患者有27例(62.8％)发生MSI，其中15例(34.9％)发生了两个以上位点的MSI，18例(41.9％)发生LOH。28例ALL患者11例(39.3％)发生MSI，4例(14.3％)发生LOH。在急性白血病中，AML与ALL的MSI发生率差别无统计学意义。5例CML患者只有2例发生MSI，1例发生LOH。其中1例加速期的患者在4个位点检出了MSI，在D5s393检出了LOH。6例MDS患者2例发生MSI，这两例患者在分型上均为转化中的原始细胞过多的难治性贫血(RAEB in transformation，RAEB-T)。其中1例在3个位点存在LOH。恶性髓系疾病的LOH发生率高于淋巴系。在AML和MDS患者中，LOH在年龄＞60岁的患者中的发生率为29／50(58.0％)，明显高于相应的平均LOH发生率。在所选的五个位点中5q21上的D5s346和5q31的D5s476的LOH发生率分别为15／82(18.3％)、17／82(20.7％)，高于其他位点。上述5个位点中正常对照组和良性 中文摘要血液病组均未出现异常变化。 结论5号染色体上5个微卫星位点检测出频率较高的MSI和LOH，恶性髓系疾病的LOH发生率高于淋巴系，且处于进展期的CML和MDS(RAE仔T)患者存在多个位点的微卫星不稳定性，此部位的微卫星不稳定性可能是髓系白血病多部位、多步骤遗传学改变的一个环节，参与髓系白血病的发生、发展。年龄较长(>6。岁)的患者LOH发生率较高，可能是由于缺陷的错配修复基因和抑癌基因引起DNA损伤积累所致。D5s346和D5s476的LOH发生率较其他位点高，提示5q21和5q31可能存在候选抑癌基因如APC、IRPI基因，在白血病的发生、发展中起一定作用。以多重PCR为基础的微卫星标记技术可以鉴别良、恶性血液病，且快速、有效地检出染色体内部的微小缺失和基因组的不稳定性，为研究白血病及其他恶性肿瘤的发生机制提供一个有价值的方法。
参考文献：
[1]. 急性白血病患者2号染色体错配修复基因连锁微卫星不稳定性研究[D]. 任志华. 青岛大学. 2003
[2]. 5号染色体微卫星不稳定性与白血病和骨髓增生异常综合征关系的研究[D]. 于燕霞. 青岛大学. 2004