（1. 吉林大学第四医院；2. 吉林大学第一医院二部 130000）
【摘要】 目的：寻求一种准确的测定血小板数的方法。方法 选取4组患者共200例，血小板计数分别为：<30×109／L、(30—50)×109／L、(50—100)×109／L、(100—300)×109／L， 每组各50例。分别通过XE-5000血细胞分析仪电阻抗法(PLT-I法)和光学法(PIT—O法)及显微镜计数血小板(PLT)。结果：当PLT<30 x 109／L时．血小板电阻抗法与镜检法对血小板计数差异有统计学意义(P<0．01)，光学法与镜检法对血小板计数比较差异无统计学意义(P>0．05)；当PLT介于(30～50)×109／L、(50—100)×109／L、(100—300)×109／L时，PLT-I法、PLT-O法与镜检法血小板计数三者之间比较差异无统计学意义(P>0．05)。 结论：当PLT低于30×109／L时，XE—5000血细胞分析仪PLT-0法比PLT-I法更准确。
【关键词】 XE-5000；血细胞分析仪；血小板计数；显微镜目测法
【中图分类号】 R2 【文献标号】 A 【文章编号】 2095-7165(2015)18-023-02
近年来，准确计数外周血中的血小板已成为检验医学界的一个热门议题，由于血小板体积小、无色、易粘附等特性，准确计数血小板绝非易事。日本Sysmex XE-5000血细胞分析仪采用电阻抗法(PLT-I法)和光学法(PIT—O法)两种方法检测血小板。本文通过显微镜目测法比较和分析XE-5000两种血小板检测方法在不同血小板水平情况下对血小板测定的准确性。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
日本Sysmex XE-5000全自动血细胞分析仪及原装进口配套试剂和质控品；OLYMPUS公司的CX-41双目显微镜；血小板计数板；1%草酸胺稀释液[1]；BD公司的EDTA-K2真空抗凝管。
1.2 检测对象
来自2015年1月—2015年7月本院住院和门诊血液病患者及健康体检者共200例,男105例，女95例，年龄6-75岁，平均年龄38岁。
1.3 检测方法
受试者清晨空腹取肘静脉血2ml加入EDTA-K2真空抗凝管中混匀，室温保存。按照XE-5000血细胞分析仪的操作规程，分别用电阻抗法(PLT-I法)和光学法(PIT—O法)两种方法检测血小板，两种方法均测定2次，结果取平均值。每一份标本在仪器检测后参照《全国临床检验操作规程》[1]立即进行手工计数，采用单盲法，由经验丰富的2位检验师进行手工镜检计数求平均值。取得的结果与XE-5000的检验结果进行对比。
1.4 统计处理
对实验数据应用SPSS17.0统计软件进行配对t检验分析处理。
2 结果
2.1 精密度试验
2.1.1 批内精密度
取PLT总数(高、中、低)值不同的抗凝静脉血各一份，根据XE-5000血细胞分析仪的操作规程，分别用电阻抗法(PLT-I法)和光学法(PIT—O法)两种方法各连续测量10次，分别计算出PLT(高、中、低)的S和CV％(见表1)。两种方法的变异系数(CV)均<3%,结果表明，仪器的批内重复性好，符合仪器的设定范围。
表1 XE-5000 PLT-I法和PIT—O法血小板批内精密度测定结果组别
2.2 准确性测定
用PLT-I法和PIT- O法两种血小板检测方法，同一时间完成6个质评标本，每个标本分别连续测定5次，所测得均值与靶值的对应关系，PLT均在±５％范围内，准确度亦符合仪器设定要求，见表3。
表3 Sysmex XE-5000 PLT-I法和PIT- O法检测血小板准确度比较
3 讨论
在血液中，血小板是最小的细胞，它是骨髓中巨核细胞质脱落下来的小块，无细胞核，表面有完整的细胞膜，血小板体积小，直经为2～4微米，呈双凸圆盘状，易受机械、化学刺激，正常人血液中血小板计数为(100～300)×109/L，l/3的血小板平时贮存在脾脏中。血小板的主要功能是凝血和止血作用，修补破损的血管。当人体受伤流血时，血小板就会成群结队地在数秒钟内封闭伤口以止血。血小板和血液中的其他凝血物质——钙离子和凝血酶等，在破损的血管壁上聚集成团，形成血栓，堵塞破损的伤口和血管，血小板还能释放肾上腺素，引起血管收缩，促进止血。血液中的血小板数低于10万/μL(100×109/L)为血小板减少，低于5万/μL(50×109/L)则有出血危险。当血小板数降低时，很容易发生出血不止的现象。因此准确计数PLT,具有极其重要的意义。
XE-5000血细胞分析仪在血小板检测通道采用鞘流电阻抗、在网织红细胞检测通道采用荧光染色结合激光流式法两种方法计数血小板，分别表示为PLT-I和PLT-O。鞘流电阻抗法能有效避免细胞重叠、侧向或返流，通过检测部产生的脉冲误差，使检测结果更准确。在网织红细胞检测通道的激光流式法因采用了DNA/RNA核酸荧光染色，因此对一些临床特殊样本如出现较多的细胞碎片、小红细胞、巨大血小板样本及脂类与蛋白的聚合体、免疫复合物等有较强的抗干扰能力，能够提供更为准确的血小板计数结果[2-5]。本文结果显示当血小板明显低于30×109／L时，PLT-O法与显微镜法计数血小板结果较为一致，电阻抗法比镜检法低，这与李勇等[6]的报道结果相似，当PLT严重减少时，PLT-O法能更准确的检测PLT数，但在目前的临床工作中，PhT-I法是检测血小板的常规检测方法，对于血液病患者和一些混有细胞碎片、大血小板、小球形红细胞的特殊标本，本文建议应用XE-5000 的PLT-O法进行检测，必要时配合显微镜镜捡，从而使血小板计数结果更准确更可靠。
参考文献
[1] 叶应妩，王毓三，申子瑜. 全国临床检验操作规程[Ｍ]．３版．南京：东南大学出版社，2006：136.
[2] 郭玉娥，赵洪泉，赵志明. 血细胞分析仪计数血小板的影响因素[J].中国误诊学杂志，2006，5(I) ：152-153．
[3] 罗丽贞,叶金锋，刘伟阳．XE-500血细胞分析仪血小板计数性能评价[J].检验医学与临床，2011，8( 4) ：399-402．
[4] 丛玉隆. 当代血液分析技术与临床[M]. 北京：人民卫生出版社，1997：34-67．
[5] 施艳. 准确计数JIiL小板的方法及临床意义[J]. 广西医学，2006，28( 10) ：1595-1598．
[6] 李勇，慕悦意，夏永辉，等. Sysmex X E-5000血液分析仪对血液疾病血小板检测的应用价值[J].中国血液流变学杂志.2011,21(2):329-369.
论文作者:张恩颖1 朴桂花1 曹忠帅2
论文发表刊物:《医师在线》2015年9月第17期供稿《医师在线》2015年9月第18期供稿
论文发表时间:2015/11/6
标签：血小板论文; 血细胞论文; 分析仪论文; 两种论文; 血液论文; 方法论文; 显微镜论文; 《医师在线》2015年9月第17期供稿《医师在线》2015年9月第18期供稿论文;