艾粉、艾片、艾油的抗氧化及抗络氨酸酶活性测定论文_卓燊1, 廖泽勇2

卓燊1 廖泽勇2(通讯作者)

(1 广西科技大学医学院 广西柳州 545005)

(2广西药用植物园 广西南宁 530023)

【摘要】目的 测定艾粉、艾片、艾油的抗氧化、抗络氨酸酶活性。方法 采用DPPH法、生化酶学法。结果 艾粉、艾片、艾油与阳性对照清除DPPH自由基的大小顺序为:熊果酸﹥维生素C﹥艾油﹥艾粉﹥艾片,在抗络氨酸酶活性实验中,艾粉、艾片在0.25mg?mL-1时抑制效果最佳分别达到31.82%、41.67%,艾油的抑制率在0.25 mg?mL-1~2.0 mg?mL-1随着浓度的增加而上升,最高达到62.50%。结论 艾粉、艾片、艾油缺乏抗氧化活性,具有一定的抗络氨酸酶活性。

【关键词】艾粉 艾片 艾油 抗氧化活性 抗络氨酸酶活性

【中图分类号】R96 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752(2014)02-0359-02

艾粉为艾纳香叶入蒸器中加热升华所得的灰白色粉状物结晶。艾片为艾粉经压榨去油,炼成块状结晶,再劈削成的颗粒状或片状物。艾油为艾纳香叶的升华物经压榨分离而制得的油,是提取天然冰片产品的附属产品,其中含有左旋龙脑、樟脑、挥发油、油脂及其他有用成份[1-3]。艾粉、艾片、艾油为艾纳香挥发油的附属产物。艾纳香为菊科艾纳香属(Blumeabalsamifera(Linn.)DC),苗药名档窝凯Diangdvobbvid植物,药用为枝叶、嫩枝根,别名:大风艾、冰片艾、家风艾、大毛药、大艾等,具有通诸窍散郁火,消肿止痛等功效,分布广西、广东、云南、海南等地,广西及贵州有栽培。

1 材料与仪器

紫外可见分光光度计(UV-2102PC/PCS型):尤尼柯(上海)仪器有限公司;分析天平:(Max220gd=0.01mg(100g),0.1mg(220g)):SartoriusCPA225D赛多利斯科学仪器(北京)有限公司。艾粉、艾片、艾油:武汉市铭业科技发展有限公司。2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl(2,2-二苯基-1-苦肼基,DPPH):Sigma-Aldrich公司。

2 实验方法

2.1抗氧化活性测定方法

2.1.1DPPH法

参照文献[4],将样品用无水乙醇配制成一系列浓度,取0.5mL试验溶液加入2.5mLc(DPPH)=0.06mmol/L的乙醇溶液,混合反应30min后测定517nm处吸光度。每份样品平行操作3次,取算术平均值,计算出对DPPH的清除率。计算公式为:

清除率%=(1-(Ai-Aj)/A0)×100%

式中Ai为2.5mLDPPH溶液与0.5mL试样溶液混合后的吸光度,Aj为2.5mL无水乙醇与0.5mL试样溶液混合后的吸光度,A0为2.5mLDPPH溶液与0.5mL乙醇混合后的吸光度。

2.1.2半数抑制率的计算

半数抑制率(IC50)指清除率为50%时所需抗氧化剂的浓度,根据不同浓度抗氧化剂的清除率作曲线求出。

2.2抗络氨酸酶活性测定方法

2.2.1药物的配置

将艾粉、艾片、艾油、维生素C、α-熊果苷、β-熊果苷分别溶于甲醇,配成浓度为0.0625、0.125、0.25、0.5、1.0、2.0mg?mL-1的试样溶液;称取0.0300g络氨酸酶底物溶于100mLPBS溶液(PH6.8,0.1M)配成浓度为0.03%多巴溶液;称取3.5g(965U?mg-1)络氨酸酶溶于25mLPBS溶液(PH6.80.1M)配成浓度为135U?mL-1酪氨酸酶溶液。

2.2.2药物对络氨酸酶的活性抑制

在试管中分别加入1mL试样溶液1mLPBS溶液(PH6.8,0.1M)和0.5mLDoPa溶液后在37℃下温育10min,然后加入0.5mL酪氨酸酶溶液(135U?mL-1)或0.5mLPBS溶液(PH6.8,0.1M)替代,在37℃下温育25min,以PBS溶液(PH6.8,0.1M)为空白调零,用紫外分光光度计在475nm处测定其吸光值、分别记为A、A0、B、B0[5]。以维生素C、α熊果苷、β熊果苷作为阳性对照,具体配置方法见表1。酪氨酸酶的抑制率按以下公式计算:

抑制率(%)=[(A-A0)-(B-B0)]/(A-A0)×100%

表1抗络氨酸酶活性测定供试液的配置方法

艾纳香植物资源丰富,分布广泛,取材方便,主要分布在我国长江以南的大部分省份。艾纳香油具有特殊的香气,具有抗菌、消炎作用,是治疗烧伤烫伤不痛不痒不留疤痕的民间特效药方,实验也证明艾油在抑制黑色素生成方面有明显的效果,若能将该药物有效成分研制成相应的药妆品,通过局部作用快速发挥药效。艾纳香可以广泛种植,集中进行收购加工,优化土地资源,形成产业链,将获得更好的效益,具有一定的经济及社会效益。

参考文献

[1]邱金东,汤昆.DPPH和ABTS法测定核桃仁的体外抗氧化活性[J].中成药,2008,30(8):1215-1216.

[2]徐瑞莲,陈映方,陈荣辉,等.传统中药复方与其单方萃取物之美白有效性评估[A].2007年健康与管理学术研讨会[C].台湾.

[3]陈铭.艾纳香的活性成分研究[D].上海:上海交通大学,2009.

[4]庞玉新.艾纳香遗传多样性与艾纳香属分子系统学研究[D].北京中医药大学.2010.

[5]袁媛,庞玉新,王文全,等.中国艾纳香属植物资源调查[J].热带生物学报,2011,2(1):78-82.

[6]袁媛,庞玉新,王文全,等.中国艾纳香属植物资源与民族药学研究[J].热带农业科学,2011,31(4):22-27.

论文作者:卓燊1, 廖泽勇2

论文发表刊物:《医药前沿》2014年第2期供稿

论文发表时间:2014-4-15

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