黑龙江乌苏里江制药有限公司 150000
【摘 要】分光光度法在很多药品有效成分测定活动中都可以发挥作用，对被测定物质进行初步处理之后，可对其在一定的波长区域或者特设的波长位置的具体光的实际吸收度进行测定，对该物质展开定量与定性等多个方面的分析。刺五加药材既可被制成保健品，同时也可被制作成药品，滴剂型的刺五加药品中的黄酮是重要成分，现利用分光光度法对刺五加滴剂之中的黄酮总含量加以测定。
【关键词】分光光度法；刺五加滴剂；黄酮；总含量
刺五加是一种重要的中药药材，其被使用的历史极为悠久，具有极高的药用价值，既可被单独服用，同时也可以与其他的药品配合使用，除了基础性的药用价值之外，还能够提升服用者的记忆力，与人参药材具有比较接近的药理作用。在该药材中，黄酮物质发挥重要作用，在制备滴剂型的刺五加药材时，必须确认黄酮物质的含量，确保该药物的药用价值可有效发挥，现分析测定新型刺五加滴剂中的黄酮物质的总含量。
1 刺五加的基本性质
刺五加属于成分复杂的中药药材，其属于五加科，多个部位均可被当做药材使用，其中根茎与干燥根的实际药用价值相对比较高，内部含有五加苷、丁香苷、黄酮物质、短梗五加苷、多糖成分以及异嗪皮啶物质等。内部的不同成分的实际性质也存有差异，其差异主要体现在物质的实际溶解性方面，双糖苷与单糖苷接可直接溶于水，但是在有机型溶剂之中难以有效溶解，异嗪皮啶在三氯甲烷以及甲醇中可直接溶解，黄酮以及紫丁香苷均可在甲醇中溶解，同时黄酮类型的成分还可以在乙醇中被有效溶解。测定黄酮成分的含量之后，可更加有效地确定由刺五加作为主要材料，制备的药品制剂的药用性。
2 黄酮含量测定分析
2.1 材料
仪器：B3200S超声波清洗器；岛津uV一2550紫外可见分光光度计，UVProbe工作站；METLERA240型电子天平；B3200S型超声波清洗机。
材料与试剂：芦丁对照品：购于中国药品生物制品检定所；甲醇分析纯；亚硝酸钠分析纯；硝酸铝分析纯；氢氧化钠分析纯；水为去离子水。样品四批：041124、050912、050914、050916自制。
2.2 方法
首先应当利用刺五加制剂来制备享用供试样品与对照品，将芦丁当做对照品，对其进行精密称取，同时获取0.5ml的自制样品，直接将其放置到量瓶之中，添加2ml的甲醇溶液，将其轻微加热，使内部物质达到溶解的程度，冷却之后，继续添加乙醇，达到一定的刻度后，摇晃均匀，可得对照品。从对照品溶液中精密称取1.0ml，将其放置到实验所用的量瓶之中，添加6ml水，而后添加亚硝酸钠溶液，摇晃至均匀。
放置6分钟后，再加10％硝酸铝试液1ml，摇匀，放置6分钟后，再加氢氧化钠试液1Oml，加水至刻度，摇匀备用。
采用仪器：UV一2550紫外分光光度计，UVProbe工作站，取上述供试品溶液，空白对照溶液，芦丁对照品溶液在400—700nm波长处进行扫描，观察得知507nm为最大吸收波长，故确定507nm波长作为样品的吸收波长。
精密度试验制备供试品溶液。取供试品溶液(041124批)，在仪器上重复测定5次，吸光度值测定结果为：0．420、0．422、0．435、0．427、0．432．平均值为0．427，相对标准偏差RSD=1．49％，小于2％，说明仪器符合试验要求。
稳定性试验取041124批样品，制备供试品溶液，然后每隔20分钟，精密取供试品溶液测定一次，测得吸光度值(吸光度平均值为0．433，RSD％=0．42％，小于2％，表明供试品溶液在2．0小时内，总黄酮吸光度基本无变化，表明供试品溶液在2小时内基本稳定。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆
重复性试验对同一批样品(041124批)进行重复性操作5次，制得5份供试品溶液，测定吸光度(总黄酮平均含量为4．2632mg／ml)相对标准偏差为1．81％，小于2％，表明本方法重复性良好。
回收率试验采用加样回收法，取已知含量的样品(041124批总黄酮含量为4．2632mg／m1)0．225g5份，精密称定，分置5个25ml量瓶中，加甲醇20ml，超声10分钟使溶解，放冷后，加甲醇至刻度，摇匀得5份提取液；分别精密量取10ml置25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，得5份稀释液。另精密称取芦丁对照品10．64mg，置10ml量瓶中，加甲醇溶解制成对照品溶液(1．064mg／ml)。精密量取5份稀释液各1.5ml，置25ml量瓶内，分别加入对照品溶液1．5ml，加水至6ml，加5％亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置6分钟，再加10％硝酸铝试液1ml，摇匀，放置6分钟，再加氢氧化钠试液10ml，加水至刻度，摇匀，放置15分钟后，置1cm比色皿中，在507nm吸收波长测定吸收度。以下式计算回收率：回收率=(测定值一样品含量)／添加量*100％，由测定结果看出，平均回收率为98．39％，变异系数RSD=0．61％(<2％)，说明此方法可行。
2.3 测定结果
测定三批样品的总黄酮含量，总黄酮含量均在4．0mg／ml以上，故暂定本品每ml含总黄酮在4．0mg以上。
3 讨论
分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法。它具有灵敏度高、操作简便、快速等优点，是生物化学实验中最常用的实验方法。许多物质的测定都采用分光光度法。在分光光度计中，将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时，便可得到与不同波长相对应的吸收强度。物质与光作用，具有选择吸收的特性。有色物质的颜色是该物质与光作用产生的。即有色溶液所呈现的颜色是由于溶液中的物质对光的选择性吸收所致。由于不同的物质其分子结构不同，对不同波长光的吸收能力也不同，因此具有特征结构的结构集团，存在选择吸收特性的最大实收波长，形成最大吸收峰，而产生特有的吸收光谱。即使是相同的物质由于其含量不同，对光的吸收程度也不同。利用物质所特有的吸收光谱来鉴别物质的存在（定性分析），或利用物质对一定波长光的吸收程度来测定物质含量（定量分析）的方法，称为分光光度法。
有效测定刺五加制剂之中的黄酮成分的具体含量时，需要选择可用且合适的测定方法，尽量缩短测定时间，以较高的效率获取精准可靠的测定结果，选择的测定方法不能对刺五加制剂产生负面影响，降低其质量，同时使其可以稳定正常地发挥出临床医用效果，分光光度发主要利用光与物质之间产生的作用来有效测定物质的成分，同时物质具有选择性吸收光的性质，分光光度法在物质的定性以及定量分析过程中均能够发挥作用，其利用不同物质具有的差异性分子结构来确定具体物质的实际含量。应用该方法的过程相对简单，同时可准确、灵敏地获取最终的物质质量，兼顾经济性、科学性与可操作性，可在其他中药材的核心成分测定过程中被继续有效使用。
4 结束语
药品制备人员应当利用手中已有的药材资源来制备出完善的药品制剂，使其在临床医学治疗活动中能够发挥出真正的作用。本文研究的主要对象为刺五加药品，其内部含有多种有效成分，包括多糖物质、黄酮物质、异嗪皮啶以及五加苷等物质，对该药品进行进一步研究后发现，其具有的挥发油以及强心苷同样也是需要发挥作用的重要成分。本文利用分光光度法，有效测定了其中的黄酮物质，测量效果好，测量效率比较高。
参考文献
[1]高腾. (2018). 刺五加茎皮中黄酮的提取及其抗氧化功能研究. (Doctoral dissertation).
[2]简勇, 丁茹, 刘舒, 刘忠英, 宋凤瑞, & 刘志强. (2017). 刺五加叶黄酮脂质体和滴丸的药动学差异比较. 应用化学, 34(1), 118-122.
[3]蒋德敏, 黄美英, 方荣美, 付荣, 唐欣义, & 陈建钧. (2017). 分光光度法测定水样中偶氮染料刚果红. 分析试验室(3), 264-268.
论文作者:董胜春
论文发表刊物:《中国医学人文》2018年20期
论文发表时间:2019/5/23
标签：物质论文; 溶液论文; 黄酮论文; 波长论文; 含量论文; 光度论文; 滴剂论文; 《中国医学人文》2018年20期论文;