张武 谢岳庭 关东 姜春来
（珠海润都制药股份有限公司研发部 广东 珠海 519041）
【摘要】 采用DB-624（0.53mm*3μm*30m）毛细管色谱柱，FID检测器，以二甲基亚砜为溶剂进行外标法定量测定药物合成中有机溶剂的残留量。乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯、二甲苯的线性范围分别为0.124～0.9988mg/ml（R2=0.9955）、0.0158～0.1260mg/ml(R2=0.9990)、0.1252～1.0016mg/ml(R2=0.9993)、0.0250～0.1996mg/ml(R2=0.9984)、0.0547mg/ml～0.4372mg/ml(R2=0.9978)。回收率测试结果满足分析测试的要求，最低检测限分别为0.5、2.34、0.06、0.03、0.089μg/m。本方法快速、准确、并有良好的重现性，可用于盐酸去甲乌药碱有机残留的检查和控制。
【关键词】 盐酸去甲乌药碱；气相色谱法；有机溶剂残留量
【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）28-0368-03
ICH[1]指南中，根据安全性和环境保护的要求将残留溶剂分为三类，按此划分：乙醇、乙酸乙酯为第三类溶剂，即低毒性或无毒性溶剂，二氯甲烷、甲苯、二甲苯为第二类溶剂，即具有一定毒性的溶剂。因此，检测这五种有机溶剂有利于药物的质量控制。本试验采用气相色谱顶空进样法测定去甲乌药碱中有机溶剂的残留量，方法简便、结果准确可靠。
1.仪器试剂
6890型气相色谱仪（Agilent），带氢火焰离子化检测器（FID）；配有色谱工作站处理系统。乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯、二氯甲烷均为HPLC级，二甲基亚砜为分析纯，盐酸去甲乌药碱为自制品。
2.实验部分
2.1 溶液制备
系统适用性溶液的配制：分别精密称取乙醇249.7mg、二氯甲烷31.5mg、乙酸乙酯250.4mg、甲苯49.9、二甲苯109.3mg、置于50ml容量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml置50ml容量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度，作为系统适用性试验溶液。
空白溶剂：二甲基亚砜。
对照品溶液的配制：取乙醇，二氯甲烷，乙酸乙酯，甲苯，二甲苯适量，精密量取，加二甲基亚砜溶解稀释成约含乙醇500.00μg/ml，二氯甲烷 60.00μg/ml，乙酸乙酯500.00μg/ml，甲苯89.00μg/ml，二甲苯217.00μg/ml。立即取5ml置20ml顶空瓶中，密封。
供试品溶液的配制：取盐酸去甲乌药碱样品适量，加二甲基亚砜溶解制成0.1g/ml的溶液。立即取5ml置20ml顶空瓶中，密封。
2.2 色谱条件
以6%氯丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷为固定液的弹性石英毛细管色谱柱（30m×0.53mm×3μm）；进样口温度：230℃；升温程序：起始温度为40℃，维持6分钟，以每分钟20℃的速率升温至200℃，保持8分钟。载气为氮气，流速3.0ml/min；进样量1ml，分流比为10:1；检测器温度为250℃；顶空进样体积：5ml；平衡温度：80℃；平衡时间：40min。
2.3 系统适用性试验
分别精密称取乙醇247.3mg、乙酸乙酯251.8mg、甲苯47.9mg、二甲苯130.9mg置于不同的50ml容量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml容量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度，作为相对应溶剂的对照溶液。再精密称取二氯甲烷5.4mg置于100ml容量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为二氯甲烷对照溶液。取2.1项下的空白溶液／系统适用性溶剂及上述各溶剂的对照溶液，按照2.2项下的色谱条件进行测定。试验结果显示，采用该方法测定上述有机溶剂，各成分均能有效分离，分离度均符合要求。测定结果见附图及表1。
2.4 精密度试验
分别取线性试验中每个溶剂的中间浓度溶液，乙醇0.4996mg/ml、二氯甲烷0.0632mg/ml、乙酸乙酯0.5008mg/ml、甲苯0.2188mg/ml、二甲苯0.0998mg/ml，重复进样5次，结果见表2。
2.5 限度试验
乙醇最小检出量1.65μg（S/N=13.0），最低检测限量0.5μg(S/N=4.0)；二氯甲烷最小检出量7.71μg(S/N=12.4)，最低检测限量2.34μg(S/N=3.1)；乙酸乙酯最小检出量0.201μg（S/N=9.1），最低检测限量0.06μg（S/N=2.8）；甲苯最小检出量0.102μg(S/N=11.8)，最低检测限量0.03μg(S/N=4.0)；二甲苯最小检出量0.294μg(S/N=13.0），最低检测限量0.089μg(S/N=3.9）。
2.6 回收率试验
取盐酸去甲乌药碱样品适量，用二甲基亚砜制成浓度约为0.1g/ml溶液，立即取5ml置20ml顶空瓶中，密封，作为空白样品。另取乙醇，二氯甲烷，乙酸乙酯，甲苯，二甲苯适量，精密称定；加上述空白样品溶液溶解稀释，浓度制成约含乙醇（600μg/ml），二氯甲烷（72μg/ml），乙酸乙酯（600μg/ml），甲苯（106.8μg/ml），二甲苯（206.4μg/ml）溶液作为原液。将原液配制为80%，100%，120%三种不同浓度的溶液。立即取5ml置20ml顶空瓶中，密封。以9份平均取样量和减去样品峰面积后的平均峰面积为对照，分别计算9份结果，测得本法回收率符合规定，结果见表3、4、5、6、7。
3.讨论
3.1 柱温的选择
柱温的升高可使有机溶剂的保留时间提前，但升高温度不利于有机残留溶剂的完全分离，因此在初始温度为60℃时，乙醇和二氯甲烷分离效果一般，当初始温度调至40℃时。两者的保留时间分别为4.200min和5.867min，分离效果较好。
3.2 柱流量的选择
在柱温条件确定之后，同时对样品的色谱条件进行了流速耐用性考查，发现样品中存在较小的其他低沸点的物质与乙醇的保留时间较接近，尽管已经达到基线分离的目的，但为了保证其分析的可靠性，试验将柱流速由4.0ml/min改为3.0ml/min，作为该试验的分析条件。
【参考文献】
[1] IMPURITIES GUIDELINE FOR RESIDUAL SOLVENTSQ3C(R3) .2005.11，INTERNATIONAL CONFERENCE ON HARMONISATION OF TECHNICAL REQUIREMENTS FOR REGISTRATION OF PHARMACEUTICALS FOR HUMAN USE.
论文作者:张武,谢岳庭,关东,姜春来
论文发表刊物:《医药前沿》2015年第28期供稿
论文发表时间:2015/12/1
标签：乙酸乙酯论文; 甲苯论文; 甲烷论文; 溶液论文; 乙醇论文; 溶剂论文; 乌药论文; 《医药前沿》2015年第28期供稿论文;