毕建中１ 黄素臻２ 马改霞２
１．三河市医院 河北 廊坊 ０６５２００;２．廊坊卫生职业学院药学教研室 河北 廊坊 ０６５００１
【摘要】 目的 建立HPLC法测定血脂清胶囊中丹参酮ⅡA 含量的方法.方法 采用AgilentSBC１８色谱柱,甲醇－水(７５:２５)为流动相,检测波长为２７０nm,流速:１．０mL/min,柱温:３０℃.结果 丹参酮ⅡA 在６．８~３００．６g/mL范围内线性关系良好(r＝０．９９９９),平均回收率为９８．９５％,RSD＝１．２７％(n＝６).结论 该法操作简便,专属性强,测定结果准确,可用于血脂清胶囊的质量控制. 【关键词】 血脂清胶囊;高效液相色谱法;含量测定【中图分类号】R９６【文献标识码】B 【文章编号】１００８－６３１５(２０１５)１２－０３４８－０１
血脂清胶囊为中药复方制剂,由大黄、茵陈、山楂等组成,具有清化湿热、涤痰祛瘀作用,药理学研究提示:本方具有良好的降脂及抗脂肪肝作用[１].现行质量标准中来收载含量测定项目不能有效的控制药品质量.方中君药丹参活血化瘀,丹参酮ⅡA 为其主要药效成分[２－３],本文以丹参酮ⅡA 为指标成分, 建立了高效液相色谱法测定血脂清胶囊中丹参酮ⅡA 的含量,为该制剂的质量控制提供了依据.
１ 仪器与试药电子分析天平(AB２０４－N,梅特勒—托利多仪器上海有限公司);高效液相色谱仪(Agilent１２６０型,安捷伦科技有限公司).丹参酮ⅡA 对照品购自中国食品药品检定研究院,批号:１１０７６６—２００４１７;血脂清胶囊由三河市医院提供,批号:２０１２１２０３、２０１３０１０３、２０１３０３０３;甲醇为色谱纯,其他试剂均为分析纯. ２ 方法与结果２．１ 色谱条件 色谱柱:AgilentSBC１８柱(５μm,３．５×１５０mm);流动相:甲醇－水(７５:２５);检测波长:２７０nm;流速:１．０mL/min;柱温:３０℃;进样量:５l..在此条件下丹参酮ⅡA 达到分离度要求且阴性对照无干扰,见色谱图１.
２．２ 溶液的制备 对照品溶液的制备:取丹参酮ⅡA 对照品约１５mg,精密称定,置２５mL棕色量瓶中,加甲醇溶解并定容,摇匀,作为对照品储备液,精密量取对照品储备液１ml置１０mL 棕色量瓶中,加甲醇定容,摇匀,即得对照品溶液.供试品溶液的制备:取本品内容物约２g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇５０ml,称定重量,加热回流１小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得供试品溶液. 阴性对照溶液的制备:取缺丹参的其他味药按处方工艺制成阴性制剂,并按照供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液. ２．３ 线性试验 精密量取对照品储备液０．１、０．５、１．０、１．５、２．０、５．０mL于１０mL 容量瓶中,用甲醇稀释定容,摇匀,制成标准溶液,分别进样５l,按“２．１”色谱条件进行测定.以丹参酮ⅡA 浓度c为横坐标,峰面积A 为纵坐标,进行线性回归,得回归方程Y＝０．２４２４c－２．２７８(r＝０．９９９９).结果表明:丹参酮ⅡA 含量在６．８~３００．６g/mL范围内,其含量与峰面积呈良好的线性关系.
２．４ 精密度、重现性和稳定性试验 精密吸取对照品溶液,按“２．１”色谱条件重复进样６次,记录峰面积,计算得丹参酮ⅡA 的RSD 为０．１２％,表明该法精密度良好. 取同一批血脂清胶囊,按“２．２”项下方法平行制备供试品溶液６份,按“２．１”色谱条件分别进样,记录峰面积,计算得丹参酮ⅡA 的RSD 为０．３７％,表明该法重现性良好.取供试品溶液,分别在０、２、４、６、８和１２h重复进样,计算得丹参酮ⅡA 峰面积的RSD分别为０．３９％,表明供试品室温放置２４h内稳定. ２．５ 回收率试验 精密称取血脂清胶囊６份,分别加入丹参酮ⅡA 对照品,按“２．２”项下供试品溶液制备方法操作,制备加样样品溶液,按“２．１”色谱条件进样测定并计算回收率,结果丹参酮ⅡA 的平均回收率为９８．９５％(n＝６),RSD 为１．２７％. ２．６ 样品测定 取３批血脂清胶囊,制成供试品溶液,进样分析,根据标准曲线计算３种化学成分的含量,结果见表１.
３ 讨论本试验考察了流动相乙腈－水、甲醇－水等,由于干扰峰及拖尾因子等因素的影响,采用了甲醇－水作为流动相进行样品的含量测定.结果表明,其分离度、理论塔板数、峰的对称性及出峰时间达到满意的结果.本试验还比较了超声提取和加热回流提取两种方法,结果表明加热回流提取效果较好. 本研究采用HPLC法测定血脂清胶囊中丹参酮ⅡA 的含量,方法快速、准确,为其质量控制提供了新手段.
表１ 血脂清胶囊中丹参酮ⅡA 含量测定结果/mg??g－１(n＝３)
图１ 高效液相色谱图
参考文献[１] 顾琴,周仲瑛,周晓波等．血脂清胶囊治疗高脂血症的药效学研究[J]．中医药学刊,２００３,２１(３):１７２－１７３． [２] 河北省医院制剂标准． [３] 丁广军．HPLC法测定醒脑清神胶囊中丹参酮ⅡA 的含量[J]．中国中医药资讯,２０１１,３(１８):３９８－３９９．
论文作者:毕建中１ 黄素臻２ 马改霞２
论文发表刊物:《中国综合临床》2015年12月供稿
论文发表时间:2016/3/2
标签：溶液论文; 胶囊论文; 色谱论文; 血脂论文; 甲醇论文; 丹参酮论文; 含量论文; 《中国综合临床》2015年12月供稿论文;